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优质抗病小麦新品种川麦618产量特性分析

《四川农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:[目的]为保障小麦生产安全,促进新品种的推广应用,在进入市场前对品种特性的分析,可为广大用户提供生产所需信息,为良种良法提供参考.[方法]利用2年区域试验和1年生产试验数据,采用AMMI模型和GGE双标图等对优质抗病小麦新品种川麦618的丰产性和稳产性进行分析.[结果]2年区域试验AMMI模型分析表明,川麦618产量处于中等水平,稳定性好.大区生产试验中,川麦618平均每666.7 m2产量450.52 kg,有效穗23.57万穗/666.7 m2,千粒重47.93 g,穗粒数47.28粒;根据AMMI分析排序图比较品种特性优劣:中科麦1816>川麦618>蜀麦1958>川育42>绵麦367>西科麦5518;GGE图分析表明,川麦618具有比较优势.[结论]小麦新品种川麦618是一个丰产性和稳产性均表现较好的优质抗病品种.

关键词: 川麦618 优质 抗病 AMMI模型 丰产性 稳产性

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7种猪繁殖障碍性疫病液相芯片快速检测方法的建立与应用

《农业生物技术学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:随着我国养猪业的发展和进步,对于疾病的鉴别诊断和大数据分析提出了更高的要求和目标.为建立一种同时检测7种猪(Sus scrofa)繁殖障碍性疫病的方法,促进高通量检测技术在动物病原检测中的发展和应用,本研究针对猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)、非洲猪瘟病毒(African classical swine fever virus,ASFV)7种猪繁殖障碍性疫病病原,设计特异性引物、探针,经反应条件优化、探针与微球偶联和杂交捕获反应,成功建立1种同时检测7种猪疫病的液相芯片检测方法,并将该方法进行临床应用.结果显示,微球与探针偶联效率较高,在液相环境中能实现对特异性目的基因捕获检测,该方法检测灵敏性较高,可同时检测到7种特异性病原的最低检测限度为103 copies/μL;该方法检测特异性好,与猪其他常见病原无交叉反应,重复性试验中组内和组间检测数据一致性较强.利用建立的方法对临床采集四川规模化猪场疑似发病的65份样品和ASFV阳性对照核酸进行检测和验证,共检出49份阳性样品,阳性率达75.38%(49/65),混合感染检出阳性率为23.08%(15/65),经单重PCR复检后结果一致,证实建立的液相芯片检测方法可应用于临床检测.本研究为猪病多种病原快速鉴别诊断提供有力的技术储备,同时为高通量检测技术的进一步发展提供参考.

关键词: 液相芯片 高通量 猪繁殖障碍疫病 临床检测

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燕麦干草和苜蓿干草的组合效应对肉兔生长性能的影响

《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:本试验旨在探讨燕麦干草和苜蓿干草的组合效应对肉兔生长性能、饲粮养分表观消化率、血清生化指标和肠道发育的影响.选择28日龄的体重相近的新西兰白兔600只,随机分为5组,每个组设置6个重复,每个重复内20只肉兔,公母各占1/2.配制燕麦干草和苜蓿干草之和占比为28%的5种试验饲粮,其中对照组饲粮中燕麦干草:苜蓿干草为0:4,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组饲粮中燕麦干草:苜蓿干草分别为1∶3、1∶1、3∶1和4∶0.预试期7 d,正试期35 d.结果显示:1)试验Ⅰ组末重和平均日增重显著高于对照组、试验Ⅲ和Ⅳ组(P<0.05),料重比显著低于对照组、试验Ⅲ和Ⅳ组(P<0.05);各组之间平均日采食量、腹泻率和死亡率差异不显著(P>0.05).2)各组之中以试验Ⅰ组饲粮各养分表观消化率最高,且试验Ⅰ组的饲粮能量、粗蛋白质、干物质和中性洗涤纤维表观消化率显著高于试验Ⅲ和Ⅳ组(P<0.05).3)各组之间血清总蛋白、白蛋白、尿素氮、葡萄糖含量与碱性磷酸酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性无显著差异(P>0.05).4)试验Ⅰ组十二指肠、空肠绒毛高度显著高于试验Ⅳ组(P<0.05),绒隐比显著高于对照组、试验Ⅲ和Ⅳ组(P<0.05).由此可见,肉兔饲粮中燕麦干草和苜蓿干草的最佳组合比例为1:3,其可促进肠道发育,提高饲粮养分消化率,进而提高肉兔的生长性能.

关键词: 燕麦干草 苜蓿干草 组合效应 肉兔 生长性能 养分表观消化率 肠道发育

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A型塞内卡病毒感染PK-15细胞环状RNA表达谱分析

《中国畜牧兽医 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】分析A型塞内卡病毒(Seneca virus A,SVA)感染猪肾上皮细胞(PK-15)后环状RNA(circular RNA,circRNA)表达谱的变化,探究circRNAs在SVA感染过程中发挥的潜在调控作用。【方法】本研究基于Illumina HiSeq 2000平台对SVA感染及对照PK-15细胞circRNAs转录组进行测序,并对差异表达circRNAs的来源基因进行GO功能及KEGG通路富集分析,通过实时荧光定量PCR对新发现的circRNAs进行表达水平鉴定。【结果】转录组测序结果显示,SVA感染组、PK-15细胞对照组中共有432种circRNAs被发现。在SVA感染PK-15细胞中,87种circRNAs表达水平相对对照组PK-15细胞显著上调,74种circRNAs表达水平显著下调。对差异表达circRNAs的来源基因进行GO功能注释分析表明,SVA感染组差异表达circRNAs来源基因主要富集于核仁、细胞器膜和细胞大分子代谢、发育等生理过程。KEGG通路富集结果显示,SVA感染组差异表达circRNAs来源基因主要富集于胞吞过程、cAMP信号通路、Rap1信号通路、Ras信号通路。对6种新发现的显著差异表达的circRNAs进行实时荧光定量PCR验证,结果显示,其表达水平与高通量测序结果趋势一致。【结论】本研究首次对SVA感染PK-15细胞的circRNAs表达谱进行差异分析,发现差异表达的circRNAs广泛参与动物机体大分子代谢、胞吞及细胞增殖、黏附、抗病毒过程,为进一步探究circRNAs在SVA感染过程中的分子机制提供了理论依据。

关键词: 环状RNA(circRNA) A型塞内卡病毒(SVA) 高通量测序 PK-15细胞

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大型艾美耳球虫重组蛋白GAPDH对兔的免疫保护效果评价

《畜牧兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:本研究旨在评价大型艾美耳球虫重组蛋白(rEm-GAPDH)对兔的免疫保护效果,为大型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的研制奠定基础。根据转录组数据筛选出Em-GAPDH基因,进行原核表达与蛋白纯化;将50只45日龄无球虫感染幼兔随机分为5组(空白对照组、不免疫攻虫组、Trx-His-S tag攻虫对照组、Quil-A saponin攻虫对照组和rEm-GAPDH免疫组),分别经颈部皮下注射1 mL PBS、1 mL PBS、1 mL PBS含100μg pET-32a空载蛋白和1 mg Quil-A、1 mL PBS含1 mg Quil-A、1mL 100μg rEm-GAPDH含1 mg Quil-A,首免14 d后同等剂量加强免疫,二免14 d后每只兔经口感染1×10~5个大型艾美耳球虫孢子化卵囊,观察各组兔临床症状,每周固定时间采血和称重,感染14 d后宰杀剖检并测定和统计各组兔的卵囊排出量、相对增重、特异性IgG抗体和细胞因子等。结果成功表达了重组蛋白rEm-GAPDH,大小在59 ku左右,且大部分表达在包涵体。免疫保护试验表明:感染后不免疫攻虫组出现症状,而免疫组症状不明显。rEm-GAPDH免疫组的卵囊减少率达57.16%,相对增重率显著大于不免疫攻虫组(P<0.05),ACI值为144.96。特异性IgG抗体水平、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、TGF-β)水平均与对照组存在显著差异(P<0.05)。大型艾美耳球虫重组蛋白rEm-GAPDH可以减少增重损失和卵囊排出,能引发宿主体内的细胞免疫和体液免疫应答,具有一定免疫保护作用,可以作为大型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的候选抗原。

关键词: 兔 大型艾美耳球虫 三磷酸甘油醛脱氢酶 重组蛋白 免疫保护

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尿素中毒对山羊肾脏氧化应激及铁死亡指标的影响

《南京农业大学学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:[目的]本研究旨在探究尿素引起山羊肾脏损伤的病理分子机制.[方法]选择健康无病的简州大耳羊 9 只,将试验羊随机分为 3 组:对照组(C组)、5%尿素组(U5 组)和 10%尿素组(U10 组),日粮供给采用粗精料混合饲喂及尿素代替部分豆粕的精料饲喂方式,对照组不加尿素,试验周期为 21 d.试验结束后,检测血清血氨含量、肾组织氧化应激指标和铁离子含量,用HE染色和Masson染色观察肾组织病理损伤,透射电镜观察肾小管上皮细胞的超微结构,qPCR检测肾组织铁死亡相关基因mRNA相对转录水平,Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4)蛋白表达水平.[结果]与对照组相比,U5 组和U10 组简州大耳羊丙二醛(MDA)含量极显著上升(P<0.01),谷胱甘肽(GSH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著下降(P<0.01),铁离子含量极显著上升(P<0.01),肾小管上皮细胞肿胀、变性、坏死,胶原纤维增生,肾小管上皮细胞线粒体皱缩,膜电子密度增加,膜嵴减少,铁蛋白重链 1 基因(FTH1)、电压依赖性阴离子通道 3 基因(VDAC3)、肿瘤抑制基因p53、核受体辅活化子 4(NCOA4)基因mRNA表达水平均极显著上升(P<0.01),GPX4 mRNA水平和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05).[结论]添加高剂量尿素导致山羊尿素中毒,NRF2 表达受到抑制并启动细胞铁死亡机制,引起肾脏氧化应激和铁离子代谢失衡.

关键词: 简州大耳羊 尿素 肾脏 铁死亡 组织病理学

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单羧酸转运蛋白1在动物体内的转运调控机制

《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:单羧酸转运蛋白1(MCT1)是动物体内最重要的单羧酸转运蛋白亚型,广泛分布于动物体的各个组织细胞中,通过参与乳酸、短链脂肪酸等单羧酸物质的跨膜转运,发挥着多种生物学功能,包括参与营养物质转运、调节pH、作为癌症治疗的靶点、调控葡萄糖代谢平衡等.本文就近年研究,总结了MCT1在单胃和反刍动物体内的定位分布、表达差异,并重点阐述了MCT1通过转运单羧酸发挥的生物学功能和转运调控机制,为MCT1在动物体内的调控机制研究提供参考.

关键词: 单羧酸转运蛋白1 生物学功能 转运调控 表达差异

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基于斜率比法评定断奶仔猪对不同铜源的相对生物学利用率

《动物营养学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:本试验旨在研究不同铜源(硫酸铜、碱式氯化铜和柠檬酸铜)和铜添加水平(20和30 mg/kg)对断奶仔猪生长性能、血清铜含量与含铜酶活性以及组织铜含量的影响,探讨断奶仔猪对不同铜源的相对生物学利用率.试验采用3×2双因子随机区组设计,选取平均体重为(8.98±0.48)kg的杜×长×大三元杂交断奶仔猪112头,随机分为7组,每组4个重复,每个重复4头猪.对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮(铜含量为7.80 mg/kg),各试验组分别在基础饲粮中添加20或30 mg/kg硫酸铜、碱式氯化铜或柠檬酸铜(均以铜含量计).试验预试期3 d,正试期28 d.结果表明:1)试验组与对照组断奶仔猪平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异(P>0.05).2)饲粮铜源和铜添加水平对断奶仔猪血清铜含量具有显著影响(P<0.05),但对血清铜蓝蛋白和铜锌超氧化物歧化酶活性均无显著影响(P>0.05).3)饲粮铜源和铜添加水平对断奶仔猪肝脏铜含量具有显著影响(P<0.05),但对心脏、肾脏、胰脏和跖骨铜含量均无显著影响(P>0.05).4)根据多元线性回归斜率比法计算,以血清铜含量为评价指标,碱式氯化铜和柠檬酸铜相对于硫酸铜(100%)的生物学利用率分别为110.39%和120.78%;以肝脏铜含量为评价指标,碱式氯化铜和柠檬酸铜相对于硫酸铜(100%)的生物学利用率分别为119.39%和136.09%.综上所述,本试验条件下,断奶仔猪对低铜饲粮(铜添加水平为20或30 mg/kg)中3种铜源的相对生物学利用率表现为柠檬酸铜>碱式氯化铜>硫酸铜.

关键词: 铜源 断奶仔猪 相对生物学利用率 斜率比法

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斯氏艾美耳球虫3-磷酸甘油醛脱氢酶重组蛋白对兔的免疫保护效果评价

《畜牧兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:旨在评价斯氏艾美耳球虫重组蛋白Es-GAPDH对兔的免疫保护效果,为兔斯氏艾美耳球虫重组亚单位疫苗的研制奠定基础。利用相对荧光定量PCR分析Es-GAPDH在斯氏艾美耳球虫不同发育时期的转录水平,并对Es-GAPDH进行原核表达与蛋白纯化;然后将42只45日龄无球虫幼兔随机分为5组(空白对照组、不免疫攻虫组、Trx-His-S tag攻虫对照组、Quil-A saponin攻虫对照组和rEs-GAPDH免疫组),分别经颈部皮下注射1 mL PBS、1 mL PBS、1 mL PBS含100μg pET-32a空载蛋白含1 mg Quil-A、1 mL PBS含1 mg Quil-A、1 mL 100μg rEs-GAPDH含1 mg Quil-A,首免14 d后同等剂量加强免疫。二免14 d后除空白对照组外,其余各组实验兔经口感染1×10~4个斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊,攻虫后观察各组临床表现,每周定时采血、称重,感染21 d后剖检观察肝组织病理变化,并测定和统计每组的相对增重、料肉比、肝指数、卵囊排出量、生化指标、特异性IgG抗体以及细胞因子等。结果发现,Es-GAPDH在斯氏艾美耳球虫各个发育阶段均有转录,且转录水平存在差异,在孢子化卵囊阶段转录水平最高。免疫保护试验表明:感染后不免疫攻虫组出现兔肝球虫病典型症状,而rEs-GAPDH免疫组症状不明显。rEs-GAPDH免疫组的卵囊减少率达87.09%,相对增重率显著大于三个攻虫对照组(P<0.05),特异性IgG抗体水平、细胞因子(IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、TGF-β)水平均与不免疫攻虫组存在显著差异(P<0.05),组织病理切片也显示,免疫组相较不免疫攻虫组肝组织被破坏程度低,虫体数量较少。综上,斯氏艾美耳球虫重组蛋白rEs-GAPDH可减少增重损失和卵囊排出,能引发宿主体内的细胞免疫和体液免疫应答,具有一定免疫保护作用,可作为斯氏艾美耳球虫重组亚单位疫苗的候选抗原。

关键词: 兔 斯氏艾美耳球虫 三磷酸甘油醛脱氢酶 重组蛋白 免疫保护

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兔斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫和大型艾美耳球虫PCR检测靶标的筛选与单一、多重直接PCR检测方法的建立

《畜牧兽医学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要:旨在建立快速、简便的兔斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫和大型艾美耳球虫直接PCR检测方法。首先克隆斯氏艾美耳球虫线粒体基因组mtDNA和3种兔球虫顶质体基因rpoB,结合GenBank中收录的其它兔球虫的相关序列进行比对分析,然后以种间差异明显的序列为靶基因在其超变区设计多对特异性引物,同时对引物浓度等条件进行优化,并评价PCR方法的敏感性和特异性。本研究首次测定了斯氏艾美耳球虫线粒体基因组全序列和3种兔球虫顶质体基因rpoB的序列,斯氏艾美耳球虫mtDNA全长6 277 bp,包括3个蛋白质基因,与其它6种兔球虫mtDNA序列相似率为93.90%~97.45%;斯氏艾美耳球虫、肠艾美耳球虫和大型艾美耳球虫顶质体基因rpoB大小在500 bp左右,三者相似性达93.93%~95.30%。靶基因筛选结果表明3种兔球虫ITS与其它基因(rpoB和mtDNA)相比较具有种内保守和种间差异大的特点,更适合用于分子诊断;基于3种兔球虫ITS序列的引物中,Ps1、Pi2、Pm2在单一或多重检测时均具有良好的特异性和敏感性。本试验通过对艾美耳球虫PCR检测候选基因靶标(ITS、mtDNA和rpoB)进行序列分析,筛选ITS为兔球虫种间差异明显的检测靶标基因,在此基础上建立的单一直接PCR方法和多重直接PCR方法具有特异、敏感、操作简便的优点,可用于3种兔球虫的流行病学调查或兔球虫病临床诊断。

关键词: 兔 斯氏艾美耳球虫 肠艾美耳球虫 大型艾美耳球虫 ITS 直接PCR

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