文献类型： 中文期刊

作者： 邬旭龙 ¹ ; 肖璐 ² ; 杨苗 ³ ; 谢礼 ³ ; 安微 ³ ; 郭杨 ³ ; 张琴 ³ ; 王印 ⁴ ; 林华 ³ ;

作者机构： 1.成都农业科技职业学院动物疫病检测中心

2.四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室

3.成都海关技术中心食品安全检测四川省重点实验室

4.四川农业大学动物医学院

关键词： 液相芯片;高通量;猪繁殖障碍疫病;临床检测

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2023 年 31 卷 001 期

页码： 203-212

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 随着我国养猪业的发展和进步,对于疾病的鉴别诊断和大数据分析提出了更高的要求和目标.为建立一种同时检测7种猪(Sus scrofa)繁殖障碍性疫病的方法,促进高通量检测技术在动物病原检测中的发展和应用,本研究针对猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)、非洲猪瘟病毒(African classical swine fever virus,ASFV)7种猪繁殖障碍性疫病病原,设计特异性引物、探针,经反应条件优化、探针与微球偶联和杂交捕获反应,成功建立1种同时检测7种猪疫病的液相芯片检测方法,并将该方法进行临床应用.结果显示,微球与探针偶联效率较高,在液相环境中能实现对特异性目的基因捕获检测,该方法检测灵敏性较高,可同时检测到7种特异性病原的最低检测限度为103 copies/μL;该方法检测特异性好,与猪其他常见病原无交叉反应,重复性试验中组内和组间检测数据一致性较强.利用建立的方法对临床采集四川规模化猪场疑似发病的65份样品和ASFV阳性对照核酸进行检测和验证,共检出49份阳性样品,阳性率达75.38%(49/65),混合感染检出阳性率为23.08%(15/65),经单重PCR复检后结果一致,证实建立的液相芯片检测方法可应用于临床检测.本研究为猪病多种病原快速鉴别诊断提供有力的技术储备,同时为高通量检测技术的进一步发展提供参考.