文献类型： 中文期刊

作者： 郑若愚 ¹ ; 肖洁 ¹ ; 白鑫 ¹ ; 陈浩 ¹ ; 蒲家艳 ¹ ; 任永军 ² ; 杨光友 ¹ ;

作者机构： 1.四川农业大学动物医学院

2.四川省畜牧科学研究院

关键词： 兔;大型艾美耳球虫;三磷酸甘油醛脱氢酶;重组蛋白;免疫保护

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2023 年 010 期

页码： 4338-4349

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在评价大型艾美耳球虫重组蛋白（rEm-GAPDH）对兔的免疫保护效果，为大型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的研制奠定基础。根据转录组数据筛选出Em-GAPDH基因，进行原核表达与蛋白纯化；将50只45日龄无球虫感染幼兔随机分为5组（空白对照组、不免疫攻虫组、Trx-His-S tag攻虫对照组、Quil-A saponin攻虫对照组和rEm-GAPDH免疫组）,分别经颈部皮下注射1 mL PBS、1 mL PBS、1 mL PBS含100μg pET-32a空载蛋白和1 mg Quil-A、1 mL PBS含1 mg Quil-A、1mL 100μg rEm-GAPDH含1 mg Quil-A,首免14 d后同等剂量加强免疫，二免14 d后每只兔经口感染1×10~5个大型艾美耳球虫孢子化卵囊，观察各组兔临床症状，每周固定时间采血和称重，感染14 d后宰杀剖检并测定和统计各组兔的卵囊排出量、相对增重、特异性IgG抗体和细胞因子等。结果成功表达了重组蛋白rEm-GAPDH,大小在59 ku左右，且大部分表达在包涵体。免疫保护试验表明：感染后不免疫攻虫组出现症状，而免疫组症状不明显。rEm-GAPDH免疫组的卵囊减少率达57.16%,相对增重率显著大于不免疫攻虫组（P＜0.05）,ACI值为144.96。特异性IgG抗体水平、细胞因子（IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10、TGF-β）水平均与对照组存在显著差异（P＜0.05）。大型艾美耳球虫重组蛋白rEm-GAPDH可以减少增重损失和卵囊排出，能引发宿主体内的细胞免疫和体液免疫应答，具有一定免疫保护作用，可以作为大型艾美耳球虫重组亚单位疫苗的候选抗原。