科研产出
异戊烯基转移酶基因克隆及植物表达载体构建
《重庆大学学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：根据已知的异戊烯基转移酶基因保守序列设计引物,以根癌农杆菌C58的Ti质粒为模板,采用PCR方法扩增获得了异戊烯基转移酶基因723bp的片段。将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序,测序片段经酶切回收后克隆到植物表达载体pB I121中,转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α。将阳性质粒转化农杆菌感受态细胞EHA105,经菌液和质粒PCR分析,获得了真核表达载体pB I121-ipt,这为异戊烯基转移酶基因功能的进一步研究提供了基础。
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一个水稻钙调素结合蛋白基因OsCaMBP的克隆及表达分析
《中国水稻科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：通过荧光差异显示和RT-PCR技术,克隆到一个新的水稻钙调素结合蛋白基因OsCaMBP。序列分析表明,该基因cDNA序列全长2094bp,编码一个具有569个氨基酸残基的多肽,推测分子量为63.2kD;在OsCaMBP蛋白的N端存在IQ钙调素结合构象,与其他植物中的钙调素结合蛋白的相似性介于38.25%~47.28%。在热激处理15min、30min、1h或2h后,该基因在水稻的叶、根和叶鞘中表达量急剧增加;此外,该基因表达量也受低温调控而增加。
关键词： 水稻 钙调素结合蛋白 荧光差异显示 基因克隆 表达
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苏云金芽孢杆菌猝倒亚种Cry1 Aa13基因的克隆及序列分析
《四川大学学报(自然科学版) 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：根据GenBank中Cry1A类基因序列设计一对特异性引物,以苏云金芽孢杆菌猝倒亚种质粒DNA为模板,应用PCR扩增技术得到一大小约为3.6kb的DNA片段(Cry1Aa13).通过引物步行法测定该片段长3598bp,其中开放阅读框(ORF)长3540bp,编码1180个氨基酸,分子量为133.49kD,等电点pI=5.0.序列比较表明该基因与Cry1Aa类基因高度同源(达95%以上),该基因已在GenBank中登录,登录号为AF510713,并被Btδ 内毒素基因国际命名委员会正式命名为Cry1Aa13.
关键词： 苏云金芽孢杆菌猝倒亚种 Cry1Aa13 PCR 克隆 序列分析
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家蚕核型多角体病毒山东株p35基因的克隆及序列分析
《遗传 》 2003 北大核心 CSCD
摘要：根据家蚕核型多角体病毒T3株p35基因非编码区序列设计一对特异性引物,应用PCR技术从家蚕核型多角体病毒山东株中扩增得到一条1080bp的片段。测序结果表明,该片段含有p35基因,开放阅读框长900bp,编码299个氨基酸,分子量为34.91kDa,pI=6.4。序列分析表明,BmNPV山东株的p35基因与T3株存在差异。
关键词： 家蚕核型多角体病毒山东株 p35基因 克隆 序列分析
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苏云金杆菌以色列亚种几丁质酶基因的克隆及序列分析
《遗传学报 》 2003 SCI 北大核心 CSCD
摘要：从苏云金芽孢杆菌以色列亚种 (Bacillusthuringiensissubspisraelensis)中提取基因组DNA ,通过合成 1对特异性引物 ,用touchdownPCR的方法扩增几丁质酶ichi基因序列 (GenBank登录号 :AF5 2 6 379)。ichi序列全长为 2 5 70bp ,含有 1个 2 0 6 7bp的开放阅读框 (ORF) ,编码 6 88个氨基酸 ,推测分子量为 75 79kDa ,等电点pI=5 90的几丁质酶前体。序列和结构比较分析表明 :Ichi氨基酸序列与蜡状芽孢杆菌 (Bacilluscereus) 2 8 9几丁质酶CW、蜡状芽孢杆菌CH几丁质酶B及苏云金芽孢杆菌墨西哥亚种几丁质酶的同源性分别为 97 2 4 %、97 18%、97 6 3% ,而与苏云金芽孢杆菌巴基斯坦亚种的同源性只有 6 3 0 7%。Ichi编码区由分泌信号肽 (46AA)、催化区 (10 5AA)、粘蛋白Ⅲ型同源区 (74AA)及几丁质结合区 (40AA)组成。
关键词： 苏云金芽孢杆菌以色列亚种 几丁质酶基因 克隆 序列分析
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Frankia菌株Cc01固氮酶结构基因的克隆
《西南农业学报 》 1992
摘要：将分离自细枝末麻黄(Casuarina cunninghamiana)的Frankia菌株Cc01的总DNA经限制酶BamHI完全酶切,电泳后用Southern法转移到硝酸纤维素滤膜上,以肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)的固氮酶结构基因(nifHDK)为探针与之杂交,其中5.5Kb的DNA片段显示较强的同源杂交。然后以P~(BR322)为载体,从Frankia菌株Cc01的总DNA中克隆了此5.5Kb的同源片段。此片段与来自肺炎克氏杆菌的nifH、nifK、nifD基因分别杂交,均显示较强的同源性,说明Frankia菌株Cc01的nifH、nifK、nifD基因紧密连锁并都位于-5.5Kb的BamHI酶切片段上。
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