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免疫亲和净化-光化学衍生液相色谱检测不同样品中的黄曲霉毒素

《中国农业科技导报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:黄曲霉毒素(aflatoxin,AFT)是一类具有高毒性的真菌毒素,常见的有AFTB1、AFTB2、AFTG1、AFTG2.对黄曲霉毒素进行快速、准确的检测是保障食品安全的重要技术手段.利用免疫亲和净化结合光化学柱后衍生液相色谱的方法对油脂类、坚果类及黄曲霉菌株培养物3种类型样品中的AFTB1、AFTB2、AFTG1及AFTG2进行定性定量分析,探索该方法对不同类型样品的净化及检测效果.结果表明:免疫亲和柱对3种类型样品的净化效果良好,能特异性对黄曲霉毒素进行吸附,没有明显的干扰峰.经过光化学衍生反应装置衍生后,4种黄曲霉毒素在25 min内得到良好的基线分离,AFTB1、AFTG1在0.1~40.0 ng·mL-1的范围内有良好的线性关系,AFTB2、AFTG2在0.03~12.0 ng·mL-1的范围内有良好的线性关系.利用免疫亲和净化-光化学衍生液相色谱法不仅能准确检测出油脂类及坚果类样品中的黄曲霉毒素,还能用于监测黄曲霉菌株的产毒情况及毒素积累规律,可为黄曲霉毒素的研究与防控提供重要技术支撑.

关键词: 黄曲霉毒素 免疫亲和 光化学衍生 液相色谱 食品安全

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非生物胁迫对转基因抗虫棉Bt蛋白表达量的影响

《西南农业学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:[目的]为研究非生物胁迫对转基因抗虫棉Bt蛋白表达量的影响.[方法]对2个转基因抗虫棉品种中棉45号(ZGK9822)和鄂抗虫棉1号(GK19)幼苗分别进行低温(4℃)、高温(37℃)、0.1、0.2、0.5 mol·L-1NaCl、轻度干旱、中度干旱、重度干旱8种非生物胁迫处理.[结果]低温及高温胁迫导致Bt蛋白含量在两个抗虫棉品种的根、茎、叶中不同程度降低,其中低温胁迫各组织Bt蛋白含量高于高温胁迫;在不同浓度盐胁迫的根、茎、叶中,与CK相比较,Bt蛋白含量呈现先降低后升高的趋势;在不同程度干旱胁迫的根、茎、叶中,Bt蛋白含量的变化趋势同盐胁迫相一致.[结论]非生物胁迫严重影响转基因抗虫棉Bt蛋白表达量,导致Bt蛋白表达量呈动态变化,田间种植转基因抗虫棉应关注环境因素的影响.

关键词: 非生物胁迫 转基因抗虫棉 Bt蛋白 表达量

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芸苔素类物质生物学活性比较研究与评价

《西南农业学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:【目的】采用不同方法对我国目前在农业部登记注册的芸苔素活性物质进行系统的生物活性鉴定,为大田应用提供剂量参考及适宜的施用方式。【方法】通过水稻第二叶片倾斜法、绿豆上胚轴伸长法和小麦叶片展开法比较5种芸苔素类物质(24-表芸苔素内酯、28-高芸苔素内酯、28-表高芸苔素内酯、22,23,24-三表芸苔素内酯和14-羟基芸苔素甾醇)的生物活性,并以24-表芸苔素内酯为代表,采用叶面喷施和灌根2种方法比较研究芸苔素类物质对芹菜、大豆生长的影响。【结果】水稻第二叶片倾斜法、绿豆上胚轴伸长法和小麦叶片展开法均能有效鉴定24-表芸苔素内酯、28-高芸苔素内酯、28-表高芸苔素内酯、22,23,24-三表芸苔素内酯和14-羟基芸苔素甾醇5种化合物的生物活性。水稻第二叶片倾斜法和黄化小麦叶片展开法中,28-高芸苔素内酯活性最高,绿豆上胚轴伸长法中24-表芸苔素内酯活性最高。总体上,芸苔素类物质的生物活性表现为28-高芸苔素内酯和24-表芸苔素内酯活性较高,28-表高芸苔素内酯和22,23,24-三表芸苔素内酯次之,14-羟基芸苔素甾醇活性较低。叶面喷施1~10μg·L-1 ·24-表芸苔素内酯促进芹菜地上部生长,叶面喷施处理下芹菜株高、根长、生物量均显著高于灌根处理。24-表芸苔素内酯处理0.05~1μg·L-1范围内,叶面喷施和灌根均有效促进大豆地上部的生长,高浓度叶面喷施和低浓度灌施24-表芸苔素内酯显著提升大豆株高和地上部生物量。【结论】3种方法均能有效鉴定5种芸苔素类物质的生物活性,其中24-表芸苔素内酯和28-高芸苔素内酯生物活性较高。24-表芸苔素内酯叶面喷施和灌根均能显著促进芹菜和大豆的生长,灌根适宜浓度低于叶面喷施。田间应用芸苔素类物质应根据芸苔素类物质的生物活性和施用方式适当调整使用剂量。

关键词: 芸苔素类物质 生物活性 叶面喷施 灌根

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达氏鲟心型脂肪酸结合蛋白的基因克隆及表达分析

《农业生物技术学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid-binding proteins, FABP-3)是脂质结合蛋白超家族的成员,主要参与机体脂肪酸摄取和转运等代谢过程。为深入了解FABP-3的结构及其在达氏鲟(Acipenser dabryanus)营养代谢及免疫调控中的功能,本研究以达氏鲟3代全长转录组测序获得的unigenes序列为基础,获得FABP-3的cDNA序列,分析FABP-3基因在不同组织、饥饿胁迫及迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)侵染作用下的表达情况。结果显示,FABP-3基因cDNA全长为641 bp (GenBank No.MN064725),其中5'非编译区为89 bp,3'非编译区为150 bp,开放阅读框为402 bp,编码133个氨基酸。其三维结构由10个β-折叠和2个α-螺旋组成,包含3个保守氨基酸残基(Arg 107, Arg 127, Tyr 129),在氨基酸6~120位置之间具有保守的脂质转运蛋白结构域。FABP-3在达氏鲟各组织中广泛分布,其中,肌肉中FABP-3表达量最高,显著高于其他组织(P≤0.05)。饥饿条件下,脑、肝和胃中的FABP-3表达量呈先上升后降低的趋势;肠道和肌肉中的FABP-3表达量在饥饿过程中出现下调,且均显著低于第0天(P≤0.05)的表达水平。迟缓爱德华氏菌侵染作用下,FABP-3在鳃和脾中呈现先下降后上升的表达趋势;感染12 h后,在肠道中的表达量是对照组的219倍。本研究结果表明达氏鲟FABP-3参与机体营养代谢及免疫应答等生物学途径,为今后达氏鲟营养及免疫调控分子机制的研究提供了理论基础。

关键词: 达氏鲟 心型脂肪酸结合蛋白 组织表达 饥饿胁迫 细菌侵染

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川麦42和川农16抗穗发芽QTL定位及聚合效应分析

《中国农业科学 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:[目的]小麦穗发芽严重影响小麦产量和品质,是全球小麦生产面临的重大问题之一.通过鉴定挖掘抗穗发芽QTL,聚合穗发芽抗性位点,选育抗穗发芽小麦品种,为四川小麦穗发芽抗性改良提供技术和材料支撑.[方法]以川麦42/川农16重组自交系(RIL,F8)为材料,于2016—2018年分别在2个环境下对RIL群体进行籽粒发芽指数(GI,2016和2018)、籽粒发芽率(GR,2016和2018)和整穗发芽率(SGR,2017和2018)3个穗发芽指标测定.利用90K SNP芯片构建的遗传图谱检测全基因组穗发芽相关QTL,并分析抗性QTL聚合效应.[结果]双亲间GI、GR和SGR指标值差异显著,亲本川农16穗发芽抗性明显优于亲本川麦42.共检测到11个与穗发芽抗性有关的QTL,主要分布在2B、2D、3A、3D、4A、5A、5B和6B染色体上.5B染色体上检测到的单个环境表达的整穗发芽QTL解释的表型变异率最大,达到29%;在2D和3A染色体上检测到的整穗发芽主效QTL,以及5A染色体上检测到的与种子休眠相关的籽粒发芽主效QTL,在2个环境下均能表达,其抗穗发芽等位变异均来源于川农16.基因型分析发现,RIL群体中不同株系聚合抗性QTL的数量变幅为1—9个,表现为抗穗发芽的株系均携带4—9个与穗发芽相关的抗性QTL.重组自交系群体中6个株系GI、GR和SGR值均在15%以下,表现出高抗穗发芽特性;这6个优异株系聚合了多个与穗发芽相关的抗性QTL,且均聚合了川麦42在4A染色体上的微效QTL(QGi.saas-4A和QGr.saas-4A),以及川农16在2D和5B染色体上的主效QTL(QSgr.saas-2D和QSgr.saas-5B);编号为104和125的优异株系已通过审定,定名为川麦104和川麦64.其中,川麦104于2012年同时通过国家和四川省审定,其抗穗发芽能力强,产量、品质、抗病等优良性状突出,聚合了7个正向穗发芽QTL,包括2B、2D和5B染色体上来源于川农16的4个抗性QTL(QGi.saas-2B、QGr.saas-2B、QSgr.saas-2D和QSgr.saas-5B),以及4A和6B染色体上来源于川麦42的3个QTL(QGi.saas-4A、QGr.saas-4A和QGr.saas-6B);近年来,川麦104已成为西南麦区小麦育种的核心亲本,育成小麦品种(系)18个.[结论]共检测到11个抗穗发芽QTL,其中3个来源于川麦42,8个来源于川农16;RIL群体中的抗穗发芽株系均携带4—9个抗性QTL,优异株系川麦104和川麦64高抗穗发芽,均聚合了7个穗发芽抗性QTL.

关键词: 小麦 穗发芽 QTL定位 QTL聚合 聚合效应

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长期不同施肥对钙质紫色水稻土重金属累积及有效性的影响

《农业环境科学学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:为探讨长期不同施肥对石灰性紫色水稻土重金属累积及有效性的影响,以四川省农业科学院土壤肥料研究所长期定位试验为依托,研究了8种不同施肥条件下[不施肥(CK)、氮肥(N)、氮磷肥(NP)、氮磷钾肥(NPK)、有机肥(M)、有机肥+氮肥(M+N)、有机肥+氮磷肥(M+NP)和有机肥+氮磷钾肥(M+NPK)]土壤理化性质、重金属全量及有效量的变化.结果表明:长期施用氮磷、氮磷钾肥会降低土壤pH、CEC含量,提高土壤有机质、碱解氮及速效磷含量,改善土壤肥力,且与有机肥配施效果更优.长期施用化肥,土壤Fe、Mn、Cu、Zn、Pb和Cd含量变化不明显,有机肥及其与化肥配施后土壤Fe、Mn、Pb含量变化也不明显,Cd略有增加,Cu、Zn含量显著提高,但均低于我国农用地土壤环境质量风险筛选值(GB 15618—2018).化肥对Cu、Zn、Pb和Cd的有效量影响不明显,磷肥可显著提高有效Fe含量,降低有效Mn含量,而有机肥提高Cu、Pb、Cd有效量,对其有活化效应.相关分析结果表明,土壤重金属有效量与理化性质、元素总量间的相关性因元素的不同而异.研究表明,长期施用化肥及有机肥不会造成石灰性紫色水稻土重金属含量超标的风险.

关键词: 长期定位施肥 石灰性紫色土 重金属 有效性

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长江上游高温伏旱区气象因子对杂交中稻产量与稻米品质的影响

《应用与环境生物学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:为探明长江上游高温伏旱区水稻不同种植季节影响产量和品质的关键气象因子,以生育期不同的3个杂交中稻品种川作优8727、德优727、天优华占为材料,研究水稻不同生育阶段的气象因子对产量与品质的影响.结果表明,随着播种期推迟,生育期逐渐缩短,3个品种全生育期从最早3月5日播种的139-150 d,缩短到最迟5月24日播种的106-115d,缩短了23.33%-23.74%.齐穗期的比叶重、叶面积指数和地上部干物重,成熟期的叶面积指数、地上部干物重和收获指数,产量及其相关性状分别在5个播种期间和3个品种间的差异均达显著或极显著水平.干物质、穗粒结构、生育期对产量贡献的决定程度高达96.17%-99.99%. 3月5日、3月25日、4月14日播期显著比5月4日和5月24日播期的产量增产,以4月14日播期产量最高,分别比5月4日和5月24日播期增产26.43%和22.01%.品种间以生育期较长的天优华占最高,分别比川作优8727和德优727增产7.71%和8.48%.气象因子对产量及其相关性状的决定系数高达97.93%-100%.移栽–拔节的相对湿度低有利于迟熟品种高产,拔节–始穗日平均气温低则有利于中早熟品种高产.随着播种期推迟,糙米率、整精米率、长宽比、蛋白质4个指标呈增加趋势,而垩白度、垩白粒率、胶稠度则呈下降趋势.稻米品质指标受气象因子影响的决定系数高达99.75%-100%.因此,长江上游高温伏旱区气象因子对水稻产量及其相关性状和稻米品质有显著影响,但其主效因子因水稻品种而异.(表9参27)

关键词: 长江上游 杂交中稻 气象因子 产量 品质

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草地贪夜蛾绿色防控技术研究进展

《植物保护 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J.E.Smith)是一种重大的入侵性害虫,具有很强的迁飞扩散和暴发取食能力。自2019年1月入侵我国云南后,在不到一年的时间内,已经扩散到了黄河流域及其以南的大部分地区,严重威胁我国玉米产业的可持续发展。化学农药作为目前应急防控措施,对抑制害虫种群、减轻玉米受害具有重要作用,但长期大量使用,必然会导致草地贪夜蛾的抗药性逐渐增强,使防控难度增加。因此,必须要寻求新的可持续治理策略以减少或替代化学农药。本文从农业防治、生物防治、物理防治、科学用药等方面总结国内外草地贪夜蛾的绿色防控技术进展,以期为我国进一步做好草地贪夜蛾的绿色防控提供参考。

关键词: 草地贪夜蛾 入侵害虫 化学抗性 农业防治 生物防治 物理防治 科学用药

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地面覆盖对避雨葡萄园土壤水分、温度及酶活性的影响

《核农学报 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:为评价不同覆盖材料在避雨葡萄园中的覆盖效果,以夏黑葡萄为试材,以地表裸露为对照(CK),设置秸秆处理(SM)、透明地膜处理(WM)、反光膜处理(RM)、地布处理(CM)4种地表覆盖处理,通过田间试验,研究不同覆盖材料下避雨葡萄园中近地表空气温度和相对湿度、土壤温度和含水量及酶活性的季节变化特征.结果表明,3-10月,WM和RM葡萄园近地表平均气温分别增加0.15℃、0.52℃、平均空气湿度分别降低4.06、4.68个百分点,而CM和SM近地表平均气温分别降低0.29℃、1.02℃,平均空气湿度分别增加2.67、7.94个百分点.与CK相比,3-10月WM的5~25 cm土层平均地温增加1.38℃,5月WM的0~60 cm土层土壤含水量增加2.77个百分点;而3-9月SM、CM和RM的5~25 cm土层平均地温分别降低3.50℃、2.56℃、1.00℃,10月地温则分别提高0.34℃、0.46℃、0.11℃,5月SM、CM和RM的0~60 cm土层土壤含水量分别提高4.24、4.06和5.60个百分点.各处理土壤脲酶、蛋白酶、酸性磷酸酶和蔗糖酶活性均表现为夏季较高、春秋季较低,而SM过氧化氢酶活性夏季较高,其他处理的过氧化氢酶活性春季较高;3-9月土壤酶指数的平均值表现为SM>CM>WM>RM>CK,分别较CK提高81.26%、27.91%、25.74%和14.55%.过氧化氢酶可作为避雨葡萄园中土壤酶活性差异的指示指标.本研究为避雨葡萄园覆盖材料的选择提供理论依据和实践参考.

关键词: 地面覆盖 葡萄园 土壤温度 土壤水分 土壤酶

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川芎种质鉴定标记开发和系统发育研究

《中草药 》 2020 北大核心 CSCD

摘要:目的基于藁本属Ligusticum叶绿体基因组高频插入缺失区域开发InDel标记,同时结合通用条形码对道地川芎及其常用混伪品进行种质鉴定和系统发育研究。方法通过8个DNA通用条形码ycf1、matK、ITS2、rpoC1、rbcL、rpoB、trnK、psbA-trnH序列片段对采集的26个川芎样品及其常用混伪品进行了扩增和测序,采用了遗传距离统计法、barcoding gap分析法和构建系统发育树法进行亲缘关系和系统发育研究。同时利用InDel分子标记,采用构建进化树法对道地川芎及其混伪品物种进行分子鉴定。结果 rbcL片段保守位点最多(97.32%),且GC含量最高(44.9%)。rbcL+rpoB片段具有最小的平均种内遗传距离(0.002 5),psbA-trnH片段具有最大的平均种间遗传距离(0.429 2)。trnK片段和rbcL+rpoB片段具有最高的种间变异,psbA-trnH片段的"barcodinggap"区重叠度最小。采用的8对DNA通用条形码无法准确地鉴定道地川芎药材与其他混伪品物种。InDel分子标记的聚类分析中,24对InDel引物中的4对引物组合能准确地鉴定出道地川芎,并将道地川芎及其混伪品物种聚类为4个分支,其中一个分支为采集的道地川产川芎药材。结论 InDel标记对道地川芎及其常用混伪品的鉴定能力高于通用条形码。对于传统的通用DNA条形码,由于遗传成分差异大,无法区分川芎及其常用混伪品。新开发出的InDel分子标记可以有效地鉴定道地川芎及其常用混伪品,从分子水平上为川芎道地性研究提供有效手段。

关键词: DNA条形码 川芎 种质鉴定 InDel 分子标记

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