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一种可同步检测3种外源基因的多重PCR方法

文献类型: 中文期刊

作者: 李忆 1 ; 邓强 2 ; 敬媛 3 ;

作者机构: 1.四川民族学院环境与生命科学系

2.四川省农业科学院分析测试中心

3.甘孜州农产品质量安全中心

关键词: T-CaMV 35S;P-CaMV 35S;pat;多重PCR;检测

期刊名称: 山西农业科学

ISSN: 1002-2481

年卷期: 2017 年 45 卷 01 期

页码: 37-40+88

摘要: 为建立一种可同步检测3种外源基因的多重PCR方法,试验选择较常见的T-CaMV 35S,P-CaMV 35S和pat这3个基因作为多重PCR检测对象,对多重PCR体系中引物浓度配比和引物退火温度进行优化。结果表明,多重PCR适宜的引物终浓度(μmol/L)配比T-CaMV 35S∶P-CaMV 35S∶pat为0.2∶0.2∶0.2以及适宜的引物退火温度为56℃;采用优化后的反应体系对多重PCR体系灵敏度进行测试,结果显示,方法灵敏度为0.5 ng;通过利用建立的多重PCR方法对已知样品进行检测,结果表明,试验建立的多重PCR体系具有良好的可靠性。

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