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多重PCR检测抗除草剂油菜RT73

文献类型： 中文期刊

作者： 李忆 1 ; 宋君 2 ; 王东 2 ; 敬媛 3 ;

作者机构： 1.四川民族学院

2.四川省农业科学院分析测试中心

3.甘孜州农产品质量安全中心

关键词： 油菜;RT73;多重PCR;检测

期刊名称： 山西农业科学

ISSN： 1002-2481

年卷期： 2017 年 45 卷 04 期

页码： 552-556+560

摘要： 为了建立一种抗除草剂油菜RT73多重PCR检测方法,试验对抗除草剂油菜RT73分子特征信息进行分析,将外源插入基因P-FMV 35S,T-E9 3′,CP4-EPSPS,GOX和油菜内源参照基因CruA等5个基因作为多重PCR检测参数,通过对多重PCR体系中引物退火温度和引物浓度配比的优化。结果显示,获得的多重PCR适宜的引物终浓度(μmol/L)配比GOX∶CruA∶P-FMV 35S∶CP4-EPSPS∶T-E9 3′为0.1∶0.1∶0.1∶0.1∶0.1以及适宜的引物退火温度为58℃;采用优化后的反应体系对多重PCR体系灵敏度进行测试,结果显示,方法灵敏度为200个拷贝;最后利用建立的多重PCR方法对已知样品进行检测,结果表明,试验建立的多重PCR体系具有良好的可靠性。

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