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道地中药材川贝母特异性PCR鉴别方法研究

文献类型： 中文期刊

作者： 张富丽 1 ; 张义蓉 1 ; 兰青阔 2 ; 杨晓凤 1 ; 刘炜 1 ; 付绍兵 3 ; 刘茜 1 ; 陈敏 1 ; 尹全 1 ;

作者机构： 1.四川省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

2.天津市农业科学院种质资源与生物技术研究所

3.青海绿康生物开发有限公司

关键词： 川贝母;多基源;特异性;聚合酶链式反应;分子鉴定

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2022 年 38 卷 019 期

页码： 59-65

收录情况： CSCD

摘要： 为建立快速检测中药材川贝母成分的特异性PCR法,从NCBI数据库下载植物HMGR基因序列,根据同源性区域设计兼并引物,对川贝母及其易混品鳞茎基因组进行扩增.通过比对川贝母特异性DNA片段区域,设计引物扩增获得川贝母基原物种特异核酸片段.从川贝母基原鳞茎中提取DNA,设计特异引物对BMH-TF/BMH-TR,优化PCR扩增条件,通过特异性、灵敏度实验验证,建立特异性PCR检测体系.采用该方法从川贝母基原中扩增出一条120 bp左右条带,而非川贝母样品、空白对照在相同条件下无扩增条带,检测灵敏度为2 ng/μL,检测下限为4 ng.对10个市售药材的检测结果证明,该方法简便可行、重现性好.该PCR法可快速、准确鉴别川贝母基原,具有操作简便、快速、特异性高的优点.

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