科研产出
四川省马铃薯孢囊线虫的形态和分子鉴定
《福建农业学报 》 2022 CSCD
摘要：[目的] 四川省越西县马铃薯发现疑似线虫侵染症状,为查清病原,对分离获得的线虫进行形态学和分子生物学鉴定.[方法] 采集马铃薯根系和根围土壤,对根系内部线虫进行染色观察,用简易漂浮法分离孢囊,并对发现的二龄幼虫、雌虫和孢囊进行显微摄影和形态学测计.提取孢囊和二龄幼虫的DNA,用种特异PCR方法进行鉴定,同时PCR扩增后获得核糖体rDNA部分18S基因、28S基因D2~D3区和ITS区DNA序列,在GenBank中下载已登录的各近似种(球孢囊线虫属)的部分序列,进行序列比对,并使用MrBayes 3.2.3软件进行贝叶斯法系统进化树的构建.[结果] 该种线虫能入侵寄主根系内部,二龄幼虫口针基部球近圆形,向后倾斜;口针平均长<23 μm;孢囊Granek比值≥3,与马铃薯金线虫高度一致.特异PCR扩增3个孢囊和4条二龄幼虫均得到了430 bp左右的明亮条带,进一步测序后得到的序列长度均为434 bp,与马铃薯金线虫一致.核糖体rDNA 18S和28S进化分析表明,该四川越西马铃薯上发现的孢囊线虫属于球孢囊属线虫,核糖体ITS基因序列进一步分析证实该群体确为马铃薯金线虫.[结论] 四川省越西县马铃薯根系分离获得的线虫为马铃薯金线虫,该线虫为我国内检和外检均十分关注的检疫性线虫,一旦传入和定殖扩散,根除十分困难.建议尽快建立马铃薯金线虫疫情监测体系,加强马铃薯种薯的检疫监督管理,增加马铃薯金线虫防控技术的研发投入、研发检测和防控技术,为我国马铃薯主粮化产业健康可持续发展保驾护航.
关键词： 马铃薯孢囊线虫 形态学 分子生物学 检疫 鉴定 监测
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四川地区华重楼(Paris polyphylla var.chinensis)主要病害调查及病原菌鉴定
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：华重楼是重要的中药材,近年来,华重楼病害已成为制约四川华重楼产量和品质提高的重要因素之一。本研究对四川种植区华重楼病害进行了调查,共调查到主要危害华重楼病害有4种。通过组织分离法对相应的病原菌进行分离,并对病原菌进行致病性测定、形态学观察和分子生物学鉴定。试验结果显示,结合病原菌形态特征及r DNA-ITS、HSP60、G3PDH、RPB2、TEF、ACT、LSU、Alt琢1、TUB基因序列分析,并构建多基因分子系统发育树,鉴定出引起华重楼4种真菌病害病原菌,分别为华重楼叶枯病（Epicoccum sorghinu）、褐斑病（Alternaria tenuissima）、灰霉病（Botrytis cinerea）和黑斑病（Alternaria alternata）。目前,危害华重楼的最为严重的病害是灰霉病、褐斑病和叶枯病。华重楼主要病害的调查及病原菌种类的鉴定为华重楼病害的防治提供理论依据。
关键词： 华重楼（Paris polyphylla var. chinensis） 病害调查 病原菌鉴定
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成都平原豇豆根腐病菌的分离与鉴定
《西南大学学报(自然科学版) 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为明确四川成都平原豇豆根腐病的病原菌种群及其致病性,本研究采集6个不同县（市）豇豆苗期和成株期的根部病样,通过组织分离与单孢纯化,基于形态特征和分子鉴定,并采用柯赫氏法则测定其致病性.结果表明:从病组织共分离获得122株真菌单孢分离物,苗期105株,成株期17株;经病菌形态特征及基于rDNA ITS序列分析,将这些菌株鉴定为茄腐镰孢菌（Fusarium solani）、尖镰孢菌（Fusarium oxysporum）、轮枝镰孢菌（Fusarium verticillioides）、层生镰孢菌（Fusarium proliferatum）和木贼镰孢菌（Fusarium equiseti）,其中尖镰孢菌（F.oxysporum）为优势菌种,分离频率为81.1%,但成株期病菌均为尖镰孢菌.采用孢子悬浮液浸根接种结果显示,各菌种代表菌株均可引起豇豆发病,表现为植株萎蔫、落叶、倒伏,根部开始出现褐色病变,根系坏死腐烂,且维管束呈红褐色.
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抑制烟草青枯病的3株放线菌筛选及鉴定
《农业生物技术学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：目前研究所获得的抑制烟草青枯病的微生物以细菌为主,放线菌(Actinobacteria)较少.本研究拟筛选可用于研制和生产防治烟草青枯病生物有机肥的放线菌,确定其分类地位.首先采用抑菌圈测定法从烟草(Nicotiana tabacum)根际土中筛选烟草青枯病拮抗放线菌,然后通过其表型特征、生理生化特征和遗传特征等多相分析来确定分类地位.结果显示,共筛选获得3株对烟草青枯病原菌(Ralstonia solanacearum)拮抗效果良好的放线菌,3株放线菌同时对烟草赤星病病原菌(Alternaria alternata)及辣椒(Capsicum annuum)、番茄(Solanum lycopersicum)和马铃薯(Solanum tuberosum)等茄科类植物青枯病原菌具有抑制作用.3株放线菌中,菌株SC-105-B-10属于细黄链霉菌(Streptomyce microflavus,GenBank No.KT633863),菌株L2-003-A-5属于微白黄链霉菌(Streptomyces albidoflavus,GenBank No.KT119348),SC-168-A-2属于链霉菌属的Streptomyces pratensis(GenBank No.KR140205).本研究筛选获得3株放线菌,具有用于研制防治烟草青枯病生物有机肥的潜力.
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黄瓜新炭疽病原的鉴定及生物学特性初探
《中国农学通报 》 2021 CSCD
摘要：明确引起黄瓜炭疽病的病原,旨在为该病的有效防治提供理论依据。通过形态学方法、柯赫氏法则验证,基于ITS、ACT和GDPH序列分析鉴定病原菌,并对该菌的生物学特性进行研究。结果表明,该菌回接黄瓜后的症状与田间症状一致。在PDA培养基上菌落为黑色,气生菌丝稀疏、灰白色;分生孢子长柱形,透明无隔;分生孢子盘着生黑色刚毛;孢子附着胞浅褐色,卵圆形,个别双生;菌丝附着胞深褐色,不规则形、浅裂或深裂。结合病原菌三基因联合建树的分析结果,可将其鉴定为Colletotrichum brevisporum。最适菌丝生长和产孢的温度25℃、pH 8,在PDA培养基上菌丝延伸最快,OA培养基上产孢最多,碳源中葡萄糖利于菌丝生长,可溶性淀粉和乳糖利于产孢,氮源中蛋白胨和酵母浸粉最适合菌丝生长,且后者产孢最多,致死温度为49℃。
关键词： 黄瓜炭疽病 Colletotrichum brevisporum 病原鉴定 多基因分子系统学 生物学特性
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四川茂县花椒根腐病病原菌的分离与鉴定
《中国农学通报 》 2021 CSCD
摘要：旨在明确引起阿坝藏族羌族自治州茂县花椒根腐病的病原菌种类,为科学有效防治该病提供理论参考。以采自茂县的花椒根腐病病根为材料,通过组织分离法、致病性测定、形态学观察与基于核糖体转录间隔区序列（ITS）和延长因子基因（tef1）的分子鉴定相结合进行病原菌的分离鉴定。结果表明,病原菌菌丝初为灰白色,后为兰褐色或紫红色。大型分生孢子为镰刀形,小型分生孢子呈肾形。分子鉴定结果显示,该病原菌在基于ITS和tef1序列构建的系统发育进化树上与腐皮镰孢菌类群处于同一分支。根据形态学和分子鉴定结果,将引起四川茂县花椒根腐病的病原菌鉴定为腐皮镰孢菌（Fusarium solani）。
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一株高产乳酸菌株的鉴定及其发酵特性研究
《中国酿造 》 2021
摘要：采用MRS培养基从果醋醋醅中分离具有强产酸能力的乳酸菌,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定,并研究其乙醇耐受能力、产酸能力和抗生素敏感性.结果表明,从果醋醋醅中分离得到一株产酸能力较高的菌株,编号为D2,并鉴定其为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus),该菌株在体积分数4%乙醇条件下能够正常生长,在体积分数14%乙醇条件下能够存活,具有较强的乙醇耐受力;在MRS肉汤培养基中发酵48 h时,总酸含量达到20.03 g/L,其中乳酸含量增加最多,其次是苹果酸和琥珀酸;对四环素、氯霉素、红霉素和吉他霉素敏感,对链霉素、卡那霉素、青霉素、苯唑西林和复方新诺明具有耐药性.综上,该菌株具有较强的乙醇耐受能力和产乳酸能力,安全性高,有作为发酵菌剂改善果醋风味和口感的潜在应用价值.
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人工合成松乳菇菌根及杂菌侵染宿主的形态学观察和分子鉴定
《食用菌学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：将松乳菇（Lactarius deliciosus）菌丝块人工接种于意大利石松（Pinus pinea）、辐射松（P.radiata）、华山松（P.armandii）3种宿主植物的幼苗根部合成外生菌根,结果表明:松乳菇与意大利石松、辐射松、华山松均可形成外生菌根,菌根呈二叉状分支,分支末端呈棒状,整体呈鲜黄色至橘黄色。在合成松乳菇菌根过程中发现,杂菌1号可与意大利石松形成外生菌根,菌根呈二叉状分支,分支端细长,呈冠状膨大,菌套表面菌丝呈卷毛状,赭色至黄棕色,颜色随着时间变深棕色;杂菌2号可与华山松形成外生菌根,菌根呈二叉状分支,末端呈球状,浅黄色且半透明状。经ITS序列鉴定杂菌1号为Sphaerosporella sp.,杂菌2号为Peziza ostracoderma。
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鸡源大肠杆菌M1株的分离鉴定及遗传进化分析
《四川畜牧兽医 》 2021
摘要：从鸡腹泻病例中分离到一株M1菌,为探明其生物学特性,利用传统细菌鉴定与16S rDNA、atpD基因序列分析进行鉴定与遗传进化分析。将M1菌纯化培养后进行菌落形态观察、生理生化试验;设计16S rDNA和atpD基因引物,反转录收集PCR产物并测序,利用DNAStar和MEGA6进行同源性比对分析,并构建系统进化树。结果得出:M1菌在镜下为革兰氏阴性短杆菌或球菌;生理生化试验显示其可发酵多种糖类,产酸产气,运动性试验呈阳性;吲哚（I）、甲基红（M）和触酶试验呈阳性;VP（V）试验、枸橼酸盐（C）利用试验、产硫化氢（H2S）试验和尿素酶试验呈阴性。16S rDNA与atpD基因同源性分析表明M1菌与大肠杆菌的同源率在99%以上。综合细菌鉴定、生理生化结果、16S rDNA和atpD基因序列分析,判定M1菌株为大肠杆菌种。
关键词： 大肠杆菌 鉴定 16S rDNA atpD 同源性分析
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