科研产出
RAPD技术对茶树品种鉴别的研究
《中国测试技术 》 2004
摘要:本研究利用RAPD技术对我国 30多个国家级及省级茶树优良品种进行了分析 ,从 36 0个十聚体随机引物中筛选出了 14 4个有多态性的引物 ,占所用引物的 4 4 %。但同时能在红茶、绿茶两大茶类上产生多态性的引物有5 7个 ,占所筛引物的 16 %左右 ,能在红茶、绿茶、乌龙茶三大类茶树种类上产生多态性的引物只有 38个 ,占所筛引物的 11%左右。 38个能在三大茶类茶树中都能产生多态性引物中仅有 2 2个引物多态性效果好 ,仅占所筛引物的6 %左右。结果发现 :使用OPI14一个引物扩增的DNA指纹图谱能区别开绿茶的 15个品种 ,使用OPI13能区别开绿茶、红茶的 12个品种 (其中绿茶 5个、红茶 7个 ) ,使用OPA10能区别开绿茶、红茶、乌龙茶共计 12个品种。研究表明了利用RAPD技术进行茶树品种鉴别是完全可行的。
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茶树基因组DNA提纯与RAPD反应系统建立
《西南农业学报 》 2001 CSCD
摘要:DNA的提取质量是决定RAPD分析成功与否的关键。茶树幼嫩新梢中含有大量的茶多酚等次生物质 ,采用磨样时添加抗酚类氧化褐变的物质 ,在细胞核裂解之前去除细胞质中的茶多酚和蛋白质 ,而后再用改进的DNA微量快速提取法———SDS法分别从不同茶树品种新梢中提取和纯化基因组DNA ,所得到的DNA样品适宜于RAPD反应。通过对茶树RAPD分析中影响扩增结果的因素的研究 ,建立了茶树RAPD的最适反应系统 ,即在 2 5ul反应体系中 ,含 2 0 - 50ng模板DNA ,1 5mmol/lMgCl2 ,各 0 1mmol/lDNTPs ,0 2umol/L引物和 1UTaqDNA聚合酶 ;扩增程序为 :95℃预变性 30 0s ,94℃变性 6 0s,35℃退火 6 0s ,72℃延伸 12 0s ,共进行 4 0个循环 ,最后 72℃延伸 6 0 0s,这样可以取得较好的扩增效果
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