科研产出
环境变化对水稻osfh1突变体成蛋白家族表达的影响
《广西植物 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：水稻成蛋白基因成员OsFH1在水稻根毛的生长发育中起着关键作用，这一过程受到环境因素的调控，当前的研究对环境因素如何与OsFH1互作调控水稻根毛的机制尚未阐明。为探索水稻成蛋白成员是否在环境因素介导的osfh1突变体根毛表型恢复中发挥作用，该研究使用1/2 MS液体培养液与1/2 MS固体培养基处理osfh1突变体，通过qRT-PCR技术分析成蛋白家族成员表达量，并对成蛋白家族进行生物信息学分析。结果表明：（1）与野生型相比，在液培中osfh1突变体主根根毛缺失，地上部分较短，侧根数量增加，在固体培养中osfh1突变体根毛缺失表型得到恢复。（2）与野生型相比，当osfh1突变体从液培到固培环境时，OsFH16表达量下降，OsFH17表达量上升，并且差异显著。（3）OsFH1、OsFH16、OsFH17都是第一类成蛋白亚家族成员，都具有生长素、赤霉素以及厌氧等与环境胁迫相关顺式作用元件，并且预测到OsFH1、OsFH16和OsFH17定位于质膜行使功能。（4）OsFHs在不同组织的表达模式分析表明，OsFH1在根部表达水平较高，而OsFH16、OsFH17在根部表达量相对较低。综上认为，由于OsFH16、OsFH17、OsFH1之间亲缘关系较高，调控模式相近且三者都可能在细胞质膜上行使功能，因此OsFH16、OsFH17可能参与环境因素与osfh1共同改变根毛表型这一过程。该研究结果为解析环境与osfh1基因共同调控水稻根毛发育机制奠定了一定理论基础，为探索植物成蛋白基因功能提出了新方向。
关键词： 成蛋白 OsFH1 根毛 qRT-PCR 水稻 生物信息分析
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四川省马铃薯病毒RT-PCR检测体系的建立
《西南农业学报 》 2010 北大核心 CSCD
摘要：根据5种主要的马铃薯病毒外壳蛋白基因序列,分别合成了5对寡聚核苷酸引物,从马铃薯病叶组织中提取出病毒总RNA,进行cDNA合成和PCR扩增,得到了与预期片段长度一致的PCR特异扩增产物。建立了马铃薯病毒检测的RT-PCR体系,并将建立的体系应用于四川省的马铃薯病毒病的检测,在基因水平上为四川省的马铃薯检测提供了新的手段。
关键词： 马铃薯病毒 反转录-聚合酶链式反应 病毒检测
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单链抗体hs83基因植物表达载体的构建
《西南农业学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：成功构建了单链抗体hs83基因植物表达载体pCAMB IA1301-hs83。首先根据基因的序列重新设计了两条含有合适酶切位点的引物,酶切位点保证了基因能够插入取代pCAMB IA1301上GUS基因的第二外显子;第二步是PCR反应克隆目的基因,然后连接到pMD-18 T载体,进行测序鉴定;第三步是对pCAMB IA1301质粒和T-hs83质粒进行双酶切,释放出两个目的片段,分别回收后连接,酶切鉴定后将重组子通过冻融法转化根癌农杆菌EHA105,并用PCR法进行鉴定。
关键词： hs83基因 植物表达载体 pCAMBIA1301 PCR 农杆菌
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葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达
《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄病毒属(Vitivirus)的典型种,在世界葡萄产区广泛分布。采集10株‘藤稔’葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现,10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒。以GVA的ELISA阳性植株为材料进行RT-PCR扩增,首次获得了GVA四川分离物SL10的完整外壳蛋白基因(CP),该基因全长597bp。将其与GenBank收录的15个GVA分离物的CP序列进行比对和构建系统进化树,把不同地理起源的GVA分离物分成两个变异组,其中Ⅰ组包括3个分离物(与Ⅱ组的其他分离物只有75.9%~80.1%的序列同一性);其余的13个分离物组成Ⅱ组(组内分离物具有84.4%~99.5%的序列同一性)。构建了GVACP的原核表达质粒PET-30-GVAcp并转化BL21菌株,经IPTG诱导,目的基因得到了大量表达。
关键词： 葡萄 葡萄A病毒 ELISA RT-PCR 外壳蛋白基因 原核表达
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