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单链抗体hs83基因植物表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 何俊蓉 1 ; 吴洁 1 ; 李萍 2 ; 阎文昭 1 ;

作者机构： 1.四川省农科院生物技术核技术研究所

2.西南交通大学生物工程学院

关键词： hs83基因;植物表达载体;pCAMBIA1301;PCR;农杆菌

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2008 年 21 卷 01 期

页码： 213-216

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 成功构建了单链抗体hs83基因植物表达载体pCAMB IA1301-hs83。首先根据基因的序列重新设计了两条含有合适酶切位点的引物,酶切位点保证了基因能够插入取代pCAMB IA1301上GUS基因的第二外显子;第二步是PCR反应克隆目的基因,然后连接到pMD-18 T载体,进行测序鉴定;第三步是对pCAMB IA1301质粒和T-hs83质粒进行双酶切,释放出两个目的片段,分别回收后连接,酶切鉴定后将重组子通过冻融法转化根癌农杆菌EHA105,并用PCR法进行鉴定。

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