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葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 刘晓 1 ; 席德慧 2 ; 袁澍 2 ; 蒋彧 2 ; 杨辉 2 ; 杜俊波 2 ; 张中伟 2 ; 陈克玲 1 ; 林宏辉 2 ;

作者机构: 1.四川省农业科学院园艺研究所

2.四川大学生命科学学院

关键词: 葡萄;葡萄A病毒;ELISA;RT-PCR;外壳蛋白基因;原核表达

期刊名称: 园艺学报

ISSN: 0513-353X

年卷期: 2008 年 35 卷 07 期

页码: 967-972

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄病毒属(Vitivirus)的典型种,在世界葡萄产区广泛分布。采集10株‘藤稔’葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现,10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒。以GVA的ELISA阳性植株为材料进行RT-PCR扩增,首次获得了GVA四川分离物SL10的完整外壳蛋白基因(CP),该基因全长597bp。将其与GenBank收录的15个GVA分离物的CP序列进行比对和构建系统进化树,把不同地理起源的GVA分离物分成两个变异组,其中Ⅰ组包括3个分离物(与Ⅱ组的其他分离物只有75.9%~80.1%的序列同一性);其余的13个分离物组成Ⅱ组(组内分离物具有84.4%~99.5%的序列同一性)。构建了GVACP的原核表达质粒PET-30-GVAcp并转化BL21菌株,经IPTG诱导,目的基因得到了大量表达。

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