科研产出
瞬时表达葡萄病毒A外壳蛋白基因对烟草中病毒转录的影响
《核农学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为验证葡萄病毒基因在模式植株上瞬时表达对接种宿主中病毒复制与感病症状的影响,本研究以一株鲜食葡萄无核王子混合感染葡萄病毒A(GVA)的不同变异株为试验材料,克隆其中一个变异株的外壳蛋白基因的部分核酸序列。在p BI121质粒35S启动子后插入具有发夹结构的外壳蛋白基因片段并转化农杆菌EHA105。农杆菌瞬时浸润本氏烟叶片5 d后,以摩擦接种GVA侵染性克隆的体外转录物作为处理组,只单独接种病毒侵染性克隆体外转录物的烟草作为对照组。结果表明,GVA体外转录产物接种30 d后,对照组植株系统叶表现黄化症状,而瞬时表达具有发夹结构的病毒外壳蛋白基因的处理组植株症状不明显,且系统叶上病毒基因的转录量相对较低,表明宿主叶片上瞬时表达病毒结构基因,可诱导植物产生抗病性,该结果为抗病葡萄种质的创制提供了一定的理论依据。
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葡萄A病毒四川分离物的外壳蛋白基因克隆与原核表达
《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：葡萄A病毒(Grapevine virus A,GVA)是葡萄病毒属(Vitivirus)的典型种,在世界葡萄产区广泛分布。采集10株‘藤稔’葡萄成熟枝条,使用6种葡萄病毒ELISA试剂盒检测发现,10个样本中有6个感染4种不同的葡萄病毒。以GVA的ELISA阳性植株为材料进行RT-PCR扩增,首次获得了GVA四川分离物SL10的完整外壳蛋白基因(CP),该基因全长597bp。将其与GenBank收录的15个GVA分离物的CP序列进行比对和构建系统进化树,把不同地理起源的GVA分离物分成两个变异组,其中Ⅰ组包括3个分离物(与Ⅱ组的其他分离物只有75.9%~80.1%的序列同一性);其余的13个分离物组成Ⅱ组(组内分离物具有84.4%~99.5%的序列同一性)。构建了GVACP的原核表达质粒PET-30-GVAcp并转化BL21菌株,经IPTG诱导,目的基因得到了大量表达。
关键词： 葡萄 葡萄A病毒 ELISA RT-PCR 外壳蛋白基因 原核表达
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