科研产出
猪肠病毒G型的分离鉴定及致病性研究
《中国猪业 》 2025
摘要：为分析临床腹泻发病猪场疫情发生的原因，在开展初生仔猪腹泻样品病毒分离试验中，获得了能够在Marc145细胞上稳定增殖的病毒，并对该病毒进行宏基因组测序、核酸序列分析、培养特性研究、仔猪回归试验等研究。该病毒的分离株鉴定为猪肠病毒G1型（EV-G1），能在Marc145、 ST、 Vero等多种细胞上生长，无胰酶依赖性，对氯仿不敏感，适应细胞培养滴度均能达到107.0TCID50/mL以上。人工感染3～5日龄仔猪，可导致一过性腹泻，在感染仔猪的脑、心脏、空肠、回肠、盲肠、结肠中均可检测到该病毒。本研究从与猪轮状病毒混合感染的组织样品中分离到1株EV-G病毒，该病毒可导致新生仔猪腹泻，且病毒有良好的细胞适应性，旨在充分了解仔猪感染EV-G病毒的致病性，为EV-G免疫原性研究以及疫苗研发奠定基础。
关键词： 猪 仔猪 猪肠病毒G型 分离鉴定 生物学特性 人工感染模型 腹泻
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桑果中非酿酒酵母的分离鉴定及混菌发酵果酒研究
《中国酿造 》 2024
摘要：为提高桑果酒风味,采用分离培养方法,从桑果中筛选非酿酒酵母并对其进行鉴定,同时对筛选菌株耐受性进行测定,并利用筛选菌株制备桑果酒,对其发酵特性进行研究.结果表明,从桑果表面筛选获得5株产香非酿酒酵母(编号为S006-01、S006-02及S007-01~S007-03),经形态学和分子生物学鉴定,确定菌株S006-01、S006-02为葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarumi),菌株S007-01、S007-02、S007-03为克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri).耐受性研究表明,菌株S007-03能在酒精度5%vol的培养液中旺盛生长,其余菌株随着酒精度的增加生长受到抑制;菌株S006-02耐SO2、耐酸能力较好.发酵特性研究表明,菌株S006-02、S007-03与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)按105∶105∶107 CFU/mL的混菌组合接种到含330 g/L葡萄糖的桑果汁中,发酵的酒液酒精度比接种单一酿酒酵母发酵的高2%vol;在模拟桑果汁中,混菌发酵(HJ)产生更多香气成分,桑果酒中酯类和醇类物质更丰富,主要为辛酸乙酯、癸酸乙酯、苯乙醇等花果香风味物质.可得出葡萄汁有孢汉逊酵母S006-02、克鲁维毕赤酵母S007-03与酿酒酵母混菌发酵性能较优,能增加桑果酒酯类和醇类物质,使香气更浓郁饱满.
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鱼腥草叶斑病及茎斑病病原菌的分离与鉴定
《中国农学通报 》 2024 CSCD
摘要：为了明确引起四川省广汉市鱼腥草新型叶斑及茎斑类病害的病原菌种类,为该病的科学防治提供理论依据,对采自广汉市的鱼腥草病茎叶通过组织消毒分离、离体接种、形态学观察与基于核糖体转录间隔区（ITS）、延长因子（tef1）、钙调蛋白（cal）和组蛋白（his3）基因的分子鉴定进行病原菌的分离鉴定。结果表明,病原菌菌丝呈灰白色到浅褐色,其分生孢子器可产生纺锤形到椭圆形的α型分生孢子以及丝状或钩状β型分生孢子。多基因联合系统发育分析表明,病原菌在大豆间座壳（Diaporthe sojae）和菜豆间座壳（D. phaseolorum）分枝外单独聚为一枝,并且3枝一起聚为一个大枝,因此建议成立一个新种—鱼腥草间座壳（D. houttuynia）来容纳此类病菌。结合形态学和分子鉴定结果,将引起广汉市鱼腥草新型叶斑及茎斑类病害的病原菌鉴定为鱼腥草间座壳（D. houttuynia）。
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花生茎源茉莉炭疽菌的分离鉴定及生物学特性研究
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：旨在探究首次从花生茎中分离出茉莉炭疽菌（Colletotrichum jasminigenum）的生物学特性。通过三点接种法，经马铃薯葡萄糖琼脂（potato dextrose agar, PDA）培养基分离培养，分别用乳酸酚棉蓝染色和扫描电镜观察其形态，提取分离真菌DNA,用PCR方法扩增ITS区并测序，比对该基因同源性及遗传进化关系。将孢子悬液以5×10~7 CFU·mL-1剂量感染昆明小鼠，并观察小鼠的临床症状、血清生化指标和剖检病变。用K-B纸片法探究其耐药表型。结果显示，分离株分生孢子长29.6μm±0.87μm,呈月牙形；菌丝透明无性，有隔和分枝，无刚毛；附着孢呈棍棒状或者卵球形。PCR扩增得到该菌ITS区序列长度为586 bp,序列提交GenBank（OR472966）。根据形态学结合ITS区序列分析结果确定分离株为茉莉炭疽菌，命名为SLY01。用SLY01菌株攻毒小鼠14 d后导致血清碱性磷酸酶含量极显著升高（P＜0.01）,肝脏器指数显著下降（P＜0.05）,并从感染小鼠体内再次分离鉴定出茉莉炭疽菌。组织病理学结果显示，试验组小鼠肺泡壁水肿伴有大量淋巴细胞浸润；肝细胞出现大面积颗粒变性，肝小叶内见出血和肝细胞坏死；肾可见肾小管上皮发生颗粒变性。药敏试验显示，SLY01菌株对卡泊芬净和伏立康唑耐药，对两性霉素B敏感，对伊曲康唑中度敏感。本研究分离鉴定得到茉莉炭疽菌，感染小鼠主要损伤靶器官为肝、肺，并且对多种药物耐药。这为进一步研究茉莉炭疽菌的防治提供理论依据。
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羊源波氏希瓦氏菌的鉴定及其生物学特性
《中国兽医杂志 》 2023 北大核心
摘要：为了探究从川南黑山羊体内分离获得的1株细菌LZS-01的致病性和生物学特性，本试验采用革兰染色、细菌形态观察、生化鉴定、16S rDNA基因序列分析、小鼠致病性试验和药敏试验对其进行研究。结果显示：菌株LZS-01为短杆状革兰阴性菌，16S rDNA基因扩增后得到的DNA片段长度为1 446 bp,与GenBank中波氏希瓦氏菌（Shewanella baltica）的同源性为100%,在系统进化树中与波氏希瓦氏菌（NCTC10737）聚为一支，综上结果推测该菌株为波氏希瓦氏菌；该菌株对小鼠致病性较强，可导致其肺泡壁增厚、肺泡腔狭窄，纤维样物质充满肺泡，肾小管上皮细胞水肿严重、管腔狭窄等；该菌株对环丙沙星、四环素等抗菌药物敏感，对氟苯尼考、青霉素和氧氟沙星等抗菌药物耐药。结果表明，波氏希瓦氏菌对动物具有一定致病性和耐药性。本试验结果为波氏希瓦氏菌感染性疾病的研究和临床防治积累了科学资料。
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成都平原豇豆根腐病菌的分离与鉴定
《西南大学学报(自然科学版) 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为明确四川成都平原豇豆根腐病的病原菌种群及其致病性,本研究采集6个不同县（市）豇豆苗期和成株期的根部病样,通过组织分离与单孢纯化,基于形态特征和分子鉴定,并采用柯赫氏法则测定其致病性.结果表明:从病组织共分离获得122株真菌单孢分离物,苗期105株,成株期17株;经病菌形态特征及基于rDNA ITS序列分析,将这些菌株鉴定为茄腐镰孢菌（Fusarium solani）、尖镰孢菌（Fusarium oxysporum）、轮枝镰孢菌（Fusarium verticillioides）、层生镰孢菌（Fusarium proliferatum）和木贼镰孢菌（Fusarium equiseti）,其中尖镰孢菌（F.oxysporum）为优势菌种,分离频率为81.1%,但成株期病菌均为尖镰孢菌.采用孢子悬浮液浸根接种结果显示,各菌种代表菌株均可引起豇豆发病,表现为植株萎蔫、落叶、倒伏,根部开始出现褐色病变,根系坏死腐烂,且维管束呈红褐色.
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四川茂县花椒根腐病病原菌的分离与鉴定
《中国农学通报 》 2021 CSCD
摘要：旨在明确引起阿坝藏族羌族自治州茂县花椒根腐病的病原菌种类,为科学有效防治该病提供理论参考。以采自茂县的花椒根腐病病根为材料,通过组织分离法、致病性测定、形态学观察与基于核糖体转录间隔区序列（ITS）和延长因子基因（tef1）的分子鉴定相结合进行病原菌的分离鉴定。结果表明,病原菌菌丝初为灰白色,后为兰褐色或紫红色。大型分生孢子为镰刀形,小型分生孢子呈肾形。分子鉴定结果显示,该病原菌在基于ITS和tef1序列构建的系统发育进化树上与腐皮镰孢菌类群处于同一分支。根据形态学和分子鉴定结果,将引起四川茂县花椒根腐病的病原菌鉴定为腐皮镰孢菌（Fusarium solani）。
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达氏鲟维氏气单胞菌的分离鉴定及病理组织学观察
《南方农业学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：【目的】查明引起达氏鲟(Acipenser dabryanus)发病死亡的病原菌及其耐药性,为该病的临床诊断和科学防治提供参考依据。【方法】以常规方法对患病达氏鲟的鳃、心脏、肝脏和肠道等组织进行病原菌分离纯化,采用形态学观察、生理生化特性鉴定与16S r RNA序列分析相结合的方法进行鉴定,通过人工感染试验明确病原菌的致病性及其病理组织学特征,并以K-B纸片扩散法进行药敏试验。【结果】从患病达氏鲟的肝脏组织中分离获得一株优势菌株(AD-AV201606),经形态学观察、生理生化特性鉴定及16S r RNA序列分析,最终鉴定为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。以维氏气单胞菌人工感染达氏鲟,可复制出与自然发病相同的临床症状,感染引起的死亡率为50%~80%,且病鱼集中在感染后1~3 d死亡。药敏试验结果表明,达氏鲟维氏气单胞菌对庆大霉素、链霉素、左氧氟沙星、四环素、环丙沙星、阿奇霉素和头孢呋辛等7种抗生素敏感,对青霉素和利福平已产生耐药性。维氏气单胞菌感染对达氏鲟造成的组织病理变化主要集中在肝脏、肠道及鳃组织。【结论】维氏气单胞菌对达氏鲟有较强的致病性,通过引起肝脏、肠道及鳃等器官组织的病理变化而造成机体损伤甚至死亡,生产上可选用庆大霉素、链霉素和四环素进行防治。
关键词： 达氏鲟 维氏气单胞菌 分离鉴定 药敏试验 病理组织学
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高效纤维素降解菌分离筛选、复合菌系构建及秸秆降解效果分析
《应用与环境生物学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：从川西高原贡嘎山区杜鹃林下土壤中分离纤维素降解菌,构建具有高效降解纤维素能力的复合菌系,并对秸秆降解效果进行分析,为农业废弃物的循环利用提供菌种资源和理论依据.样品及经风干、高温等预处理后,采用平板涂布法进行分离,共获得79株菌株;通过刚果红实验对分离获得的菌株进行初步筛选,运用DNS法测定各菌株的羧甲基纤维素酶活(Carboxymethyl cellulase,CMCase),复筛得到15株具有CMCase活能力的菌株.经滤纸条崩解实验、秸秆崩解实验及降解率测定,最终确定了各菌株的纤维素降解能力,进一步经拮抗实验,选取相互无拮抗的菌株构建5个复合菌系:A(112、146、156、171),B(145、147、150、153),C(110、116、174),D(147、154、171),E(145、146、150、152、153).复合菌系的滤纸酶活(Fpase)与秸秆降解率测定结果显示,组合C对秸秆的降解率较单菌株116提高了50.71%,组合D对秸秆的降解率较单菌株154提高了41.54%.经形态学和分子生物学鉴定,纤维素降解能力比较好的两个组合中的菌株分别被鉴定为类芽孢杆菌属(Paenibacillus sp.)、芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、不动杆菌属(Acinetobacter sp.)以及链霉菌属(Streptomyces sp.).本研究表明,复合菌系纤维素降解能力优于单一菌株,C、D两组复合菌系表现出较高的纤维素降解能力,具有进一步开发的价值.
关键词： 纤维素降解 分离鉴定 复合菌系 滤纸崩解 玉米秸秆
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鸡蛋中梅氏弧菌药敏试验及氨基酸代谢研究
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：从一份鸡蛋样品内部分离出致病性弧菌:梅氏弧菌,并对其进行药敏实验和蛋白质、氨基酸代谢研究。结果表明,该菌有较强的溶血能力,且对环境适应能力极强,在25~43℃均能生长;药敏试验结果表明多种抗生素对此菌有一定的抑制作用,但罗红霉素对其无抑制;梅氏弧菌的代谢对水解氨基酸和蛋白质总量影响不大,但可明显降低发酵培养基中游离氨基酸的含量,其中GLU、IEU、HIS、ASP、SER 5种氨基酸降低较明显。本文从梅氏弧菌的溯源及致病性进行讨论,旨在为鸡蛋食用安全防控提供一定的理论依据。
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