文献类型： 中文期刊

作者： 刘菲 ¹ ; 唐卫杰 ² ; 程安春 ³ ; 汪铭书 ³ ; 赵婷婷 ⁴ ;

作者机构： 1.南阳医学高等专科学校

2.四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川省大英县畜牧局

3.动物疫病与人类健康四川省重点实验室

4.四川农业大学农学院农业部西南作物生理生态与耕作重点实验室四川省农科院作物所

关键词： 抗鹅细小病毒卵黄IgG;纯化;间接ELISA;应用

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2011 年 06 期

页码： 601-606

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用水稀释-辛酸-硫酸铵法粗提与DEAE50纤维素层析相结合的方法从免疫鹅细小病毒(GPV)的鹅卵内提取鹅卵黄IgG,通过核酸蛋白检测仪和SDS-PAGE测定IgG的浓度和纯度后,制备兔抗鹅IgG酶标抗体;建立了针对GPV的间接ELISA抗体检测方法,确定其最佳工作条件,并对该ELISA的特异性及重复性进行检测;应用该间接ELISA检测了GPV VP3基因疫苗的免疫效果。结果显示,获得的纯化鹅卵黄IgG浓度为10mg/mL,抗体纯度达到94.5%,兔抗鹅IgG的血清琼脂扩散效价约为1∶32;经筛选确定该ELISA的最佳工作条件为:最适抗原包被浓度为20μg/mL,最适血清稀释度为1∶100,酶标抗体的最佳工作浓度为1∶3 000。用建立的间接ELISA检测禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒、鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒的阳性血清均为阴性,表明该方法特异性强、重复性好。经临床初步应用,能检出GPV VP3基因疫苗产生的抗体,在肌肉注射100μg与200μg基因疫苗的鹅血清中,IgG均从第14天开始上升,并分别在第35、21天达到最大值。表明本试验制备的兔抗鹅IgG酶标抗体具有较好的应用价值。