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中国兰SRAP-PCR体系的建立及优化

文献类型： 中文期刊

作者： 蒋彧 1 ; 李萍 2 ; 王海娥 1 ; 何俊蓉 1 ; 刘菲 2 ; 卓碧萍 1 ; 袁宁 1 ;

作者机构： 1.四川省农业科学院园艺所

2.西南交通大学

关键词： 国兰;SRAP-PCR;正交设计;反应体系

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2010 年 23 卷 05 期

页码： 1648-1651

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 序列相关扩增多态性(SRAP)是新一代的分子标记技术,尚未在兰花中应用过。本实验运用改进了的CTAB法提取国兰总DNA,并L16(45)正交设计,对影响中国兰PCR反应的4个因素(引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、扩增模版)在4个水平上进行优化试验,结果采用DPS软件分析。结果表明,在25μl总体积中,Taq酶为1个单位的情况下,中国兰SRAP-PCR反应最佳扩增体系为:Mg2+2 mmol.L-1、DNA模版100μg、dNTPs 0.25 mmol.L-1、引物0.3μmol.L-1。这一优化的SRAP-PCR体系的建立为后续国兰SRAP分析奠定基础。

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