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鸡传染性喉气管炎病毒抗原双抗夹心ELISA方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 谢晶 1 ; 于吉锋 1 ; 肖璐 1 ; 吴学婧 1 ; 叶勇刚 1 ; 魏勇 1 ; 李兴玉 1 ; 曹冶 1 ; 潘梦 1 ; 毛从剑 1 ; 杨竣雁 1 ; 叶健强 1 ; 曾子轩 1 ; 康玮笠 1 ; 康润敏 1 ;

作者机构: 1.四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室

关键词: 鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV);单克隆抗体;双抗夹心ELISA

期刊名称: 中国动物检疫

ISSN: 1005-944X

年卷期: 2025 年 42 卷 006 期

页码: 99-105,127

摘要: 为建立鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)抗原的检测方法,利用ILTV gJ蛋白的2株单克隆抗体,1株用作捕获抗体,另1株经辣根过氧化物酶(HRP)标记后用作检测抗体,采用棋盘法优化反应条件,建立了一种检测ILTV抗原的双抗夹心ELISA方法,并对其进行了性能评估。结果显示:捕获抗体的最佳包被质量浓度为2μg/m L,酶标单克隆抗体的最适稀释度为1:4 000;临界值为0.295 6,当待测样品OD450 nm值大于0.295 6且P/N值大于2时,判为阳性;建立的双抗夹心ELISA方法可特异性检测ILTV抗原,而对其他禽类常见抗原的检测结果均为阴性;最低检测限为49.4 ELD50/0.1 mL,批内和批间变异系数均小于10%。48份临床样品的检测结果显示,该方法与行业标准中PCR方法的符合率为93.75%。结果表明,本研究建立的ILTV双抗夹心ELISA方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于ILTV抗原检测。该方法的建立为该病的检测、监测以及防控提供了技术支撑。

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