文献类型： 中文期刊

作者： 罗苹 ¹ ; 敬媛 ¹ ; 尹全 ¹ ; 常丽娟 ¹ ; 邓强 ¹ ; 牛蓓 ¹ ; 宋君 ¹ ; 王东 ² ;

作者机构： 1.;四川省农业科学院分析测试中心;四川省农业科学院质量标准研究所;甘孜州农产品质量安全中心;成都大学医学院

2.;四川省农业科学院分析测试中心;四川省农业科学院质量标准研究所;甘孜州农产品质量安全中心;成都大学医学院;

关键词： 吐温-20;抗虫棉;外源蛋白;提取效率

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2017 年 08 期

页码： 1777-1783

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】探究吐温-20对转基因棉中Bt蛋白提取效率的影响程度,为转基因植物外源蛋白提取方法标准化,进而精准转Bt基因棉品种审定准入项目检测数据提供理论依据。【方法】配制7种不同吐温-20含量的提取液,提取抗虫棉GK19及非转基因棉泗棉3号苗期叶片、蕾期叶片和小蕾、铃期叶片和小铃中可溶性总蛋白,测定提取液中Bt蛋白和可溶性总蛋白含量,比较不同吐温-20含量提取液蛋白提取效率的差异。【结果】结果表明,吐温-20对抗虫棉中外源Bt蛋白提取效率有显著影响,蛋白提取缓冲液中吐温-20含量为0.55%是最适的。【结论】在蛋白提取缓冲液中加入适量吐温-20可明显提高抗虫棉外源Bt蛋白的提取效率,而不影响标准曲线R平方值(R~2)。过量添加吐温-20,超过一定的限度,检测变异系数加大,检测值可信度降低,检测结果无意义,因此准确控制蛋白提取缓冲液成分含量十分必要。