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利用CRISPR/Cas9技术创制黄果番茄新种质

文献类型: 中文期刊

作者: 龙海成 1 ; 马燕勤 1 ; 周玉洁 1 ; 常伟 1 ; 李菊 1 ; 李志 1 ; 苗明军 1 ; 杨亮 1 ;

作者机构: 1.四川省农业科学院园艺研究所蔬菜种质与品种创新四川省重点实验室/农业农村部西南地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室;四川农业大学资源学院;四川省蔬菜工程技术研究中心;四川省食用菌研究所

关键词: 番茄;CRISPR/Cas9;八氢番茄红素合成酶1(PSY1);基因编辑;黄果番茄

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2024 年 32 卷 07 期

页码: 1693-1702

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 目前国内市场上优异黄果番茄(Solanum lycopersicum)品种相对稀缺,为了满足市场需求,提高种业竞争力,本研究以'MoneyMaker'('MM')番茄为材料,利用CRISPR/Cas9技术,对番茄八氢番茄红素合成酶1 (phytoene synthase 1, SlPSY1)基因(Solyc03g031860)进行定向基因编辑来创制黄色果实番茄。选择SlPSY1基因外显子区域2个序列特异的sgRNA作为靶位点,构建CRISPR/Cas9双元表达载体p KSE401,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的叶盘转化法对'MM'番茄材料进行遗传转化。结果显示,16株再生苗中鉴定出了12株阳性转基因植株,阳性转化率为75%;对阳性转基因植株的靶位点测序分析发现,有8株在2个靶位点上共发生21次编辑事件,基因编辑效率为66.7%,且均未发生脱靶现象;获得的突变植株中有5株在成熟期果实表现为黄色。本研究利用CRISPR/Cas9技术在'MM'番茄上成功创制了SlPSY1基因编辑材料,为今后快速创制番茄黄果资源提供技术及材料基础。

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