科研产出
四重PCR检测抗除草剂转基因油菜T45
《南方农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】建立多重PCR检测抗除草剂转基因油菜T45的方法,为其转基因检测提供技术支持。【方法】选择油菜内源参照基因Cru A、外源基因P-Ca MV 35S、T-Ca MV 35S和pat作为四重PCR检测基因,特异性引物序列参照国家相关标准或文献,通过对多重PCR退火温度和引物浓度的优化、灵敏度测试及已知样品验证,建立抗除草剂转基因油菜T45多重PCR检测体系。【结果】多重PCR的适宜退火温度为58℃,适宜引物终浓度(μmol/L)配比Cru A∶P-Ca MV35S∶T-Ca MV 35S∶pat为0.1∶0.2∶0.2∶0.2,方法灵敏度为0.01 ng/μL,所有已知样品的扩增条带与其分子特征显示的外源基因元件完全一致。【结论】建立的抗除草剂转基因油菜T45品系四重PCR检测方法可实现在一个反应体系中同时检测抗除草剂转基因油菜T45内源参照基因和多个外源基因成分,为转基因油菜T45提供了一种有效的检测手段。
全文链接
请求原文
转Bt基因稻米的降落PCR-毛细管电泳快速检测研究
《中国卫生检验杂志 》 2012
摘要：目的:建立转Bt基因稻米的降落PCR-毛细管电泳快速定性检测方法。方法:转Bt基因稻米经磨碎后提取基因组DNA,对其内源蔗糖磷酸合酶SPS基因和抗虫毒蛋白Bt基因同时进行聚合酶链反应(PCR)扩增,产物用无胶筛分毛细管电泳分离、激光诱导荧光检测器检测。结果:在优化条件下,25 min内即可完成SPS和Bt基因的检测,日内精密度在2.37%～3.19%之间,特异性实验结果表明本法特异性较高。结论:所建立的方法快速、分离效能高、样品用量少且成本低廉,适用于转Bt基因稻米的快速鉴定。
关键词： 转Bt基因稻米 降落PCR 毛细管电泳 激光诱导荧光检测
全文链接
请求原文
首页上一页1下一页尾页
