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四重PCR检测抗除草剂转基因油菜T45

文献类型： 中文期刊

作者： 尹全 1 ; 刘勇 2 ;

作者机构： 1.四川省农业科学院分析测试中心

2.四川省农业科学院植物保护研究所

关键词： 油菜;多重PCR;毛细管电泳;分子检测

期刊名称： 南方农业学报

ISSN： 2095-1191

年卷期： 2016 年 47 卷 06 期

页码： 883-888

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立多重PCR检测抗除草剂转基因油菜T45的方法,为其转基因检测提供技术支持。【方法】选择油菜内源参照基因Cru A、外源基因P-Ca MV 35S、T-Ca MV 35S和pat作为四重PCR检测基因,特异性引物序列参照国家相关标准或文献,通过对多重PCR退火温度和引物浓度的优化、灵敏度测试及已知样品验证,建立抗除草剂转基因油菜T45多重PCR检测体系。【结果】多重PCR的适宜退火温度为58℃,适宜引物终浓度(μmol/L)配比Cru A∶P-Ca MV35S∶T-Ca MV 35S∶pat为0.1∶0.2∶0.2∶0.2,方法灵敏度为0.01 ng/μL,所有已知样品的扩增条带与其分子特征显示的外源基因元件完全一致。【结论】建立的抗除草剂转基因油菜T45品系四重PCR检测方法可实现在一个反应体系中同时检测抗除草剂转基因油菜T45内源参照基因和多个外源基因成分,为转基因油菜T45提供了一种有效的检测手段。

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