科研产出
白芥子诱导的鸡内源性芥子碱降解菌的筛选、鉴定及酶活测定
《中国饲料 》 2023 北大核心
摘要：本试验旨在通过分离鉴定白芥子诱导的芥子碱降解菌,并对其核心功能酶漆酶进行酶活测定,建立芥子碱的生物降解方法,为探寻白芥子等十字花科类非粮饲料资源的高效利用提供技术支撑.本试验以藏香鸡为模型,在基础日粮中添加20%白芥子饲喂28 d进行芥子碱降解菌体内诱导.分别采集鸡空肠、回肠、盲肠内容物在不同培养基中分离筛选芥子碱降解菌,对筛选出的优势菌进行形态学和分子生物学鉴定,测定该菌株的芥子碱降解效果和漆酶活性.结果表明:(1)在鸡盲肠中筛选出9株目标菌,筛出率明显高于空肠和回肠,并进一步选出1株芥子碱降解优势菌SDB2(Sinapine-degrading bacteria 2).(2)经鉴定,SDB2菌株属于变形菌门;γ-变形菌纲;肠杆菌目;肠杆菌科;大肠埃希菌.(3)芥子碱浓度与SDB2菌株培养时间存在极显著的线性回归关系(P<0.01),芥子碱浓度随培养时间增加而降低,培养72 h的芥子碱降解率可达50%.(4)漆酶活力与SDB2菌株培养时间存在极显著的线性回归关系(P<0.01),漆酶活力随培养时间增加而降低.(5)漆酶活力与芥子碱浓度存在极显著的线性回归关系(P<0.01),漆酶活力与芥子碱浓度呈正相关.综上,本试验条件下,筛选出的SDB2能利用自身分泌的漆酶有效降解芥子碱,为高效利用十字花科类非粮饲料资源奠定了基础.
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芥子碱和硫酸铜对芥子碱降解菌酶活力的影响
《西南农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：【目的】本试验通过研究芥子碱、硫酸铜以及培养时间对芥子碱降解菌1(Sinapine-degrading Bacteria 1, SDB1)相关酶活力的影响,旨在探索SDB1中参与芥子碱降解的酶类以及影响酶活的因素。【方法】把30个SDB1的基础平板培养基平均分成1个对照组和4个处理组,每组6个重复。对照组除基础培养基外不再添加其他成分;处理1组和处理2组分别在基础培养基中添加0.40和0.80 g/L的芥子碱;处理3组和处理4组分别在基础培养基中添加1.00和3.00 mmol/L的硫酸铜。收集培养液,测定培养2、4、6、8 d后菌液中淀粉酶、多酚氧化酶、β-葡萄糖苷酶、漆酶、乙酰胆碱酯酶和脂肪酶的活力。【结果】①从对照组的结果看,SDB1具有一定的淀粉酶活性。与对照组相比,添加0.40 g/L芥子碱培养8 d,SDB1淀粉酶的活力是对照组的2.32倍(P<0.05),添加0.80 g/L芥子碱对SDB1淀粉酶活力没有显著影响。②SDB1具有多酚氧化酶活性。添加0.80 g/L芥子碱,多酚氧化酶活性在培养的第2和4天,分别比对照组增加了75.70%(P<0.01)和197.03%(P<0.01)。③SDB1具有较高的漆酶活性,且漆酶活性有随培养时间延长而增加的趋势。芥子碱可以提高SDB1的漆酶活力。添加0.40和0.80 g/L的芥子碱均可以提高SDB1漆酶活力,其中添加0.40 g/L的芥子碱培养4 d,SDB1漆酶活力是对照组的6.25倍(P<0.01);添加0.80 g/L的芥子碱培养4、6和8 d,漆酶活力分别为对照组的5.92(P<0.01)、3.03(P<0.01)和5.70倍(P<0.05)。④SDB1不具有β-葡萄糖苷酶活性,添加芥子碱对SDB1β-葡萄糖苷酶活力也没有显著影响。⑤SDB1具有一定的乙酰胆碱酯酶活性。与对照组相比,添加0.80 g/L芥子碱培养6 d,SDB1的乙酰胆碱酯酶活性显著降低(P<0.05),添加0.4 g/L芥子碱对SDB1乙酰胆碱酯酶活性没有显著影响。⑥SDB1具有一定的脂肪酶活性。添加0.40、0.80 g/L的芥子碱对SDB1脂肪酶活性没有显著影响。⑦添加1.00和3.00 mmol/L的硫酸铜对SDB1淀粉酶、多酚氧化酶、漆酶、β-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶和脂肪酶活力均没有显著影响。(结论)本试验条件下,SDB1具有淀粉酶、多酚氧化酶、漆酶、乙酰胆碱酯酶和脂肪酶的活性,不具有β-葡萄糖苷酶的活性。在培养基中添加芥子碱,可以在培养的4～8 d内不同程度的提高SDB1淀粉酶、多酚氧化酶、漆酶活性;添加芥子碱对SDB1的β-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶、脂肪酶活性没有显著影响;添加硫酸铜对SDB1的淀粉酶、多酚氧化酶、漆酶、β-葡萄糖苷酶、乙酰胆碱酯酶和脂肪酶活性均没有显著影响。
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芥子碱降解菌1对昆明小白鼠LD50的研究
《黑龙江畜牧兽医 》 2018 北大核心
摘要：为了确定腹腔注射芥子碱降解菌1(sinapine-degrading bacteria 1,SDB1)对昆明小白鼠的安全性,试验分别采用革兰氏染色镜检法、活菌计数法、临床诊断、病理剖检和寇氏法对SDB1的特征、原菌液浓度、致病性以及SDB1对昆明小白鼠的半数致死量(LD50)进行了研究.结果表明:SDB1为中等大小、两端钝圆、散在或成对的革兰阴性杆菌.原菌液浓度为2.28*1010cfu/mL.腹腔注射SDB1后12小时,昆明小白鼠出现精神萎靡、食欲废绝、眼睛发炎、腹泻等临床表现;腹腔注射后10小时发生死亡;腹腔注射后1224小时死亡达高峰,死亡数量与SDB1的腹腔注射量呈明显剂量-效应关系;耐过的昆明小白鼠2 d后不再发生死亡,且精神、食欲等逐步恢复正常.死亡昆明小白鼠主要病理剖检变化为肺脏肿大、瘀血、出血严重;胃肠充血、出血;肝脏、脾脏肿大.SDB1对昆明小白鼠的LD50为3.80*108cfu,其95%可信限为2.96*1084.88*108cfu.说明SDB1对昆明小白鼠有致病和致死性.
关键词： 芥子碱 降解菌 昆明小白鼠 寇氏法 致病性 半数致死量
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菜籽粕芥子碱的热醇提取
《饲料工业 》 2016 北大核心
摘要：试验旨在分离提取菜籽粕中的芥子碱,为进一步研究芥子碱的功能提供试验材料。将市售菜籽粕样品混合均匀后采用石油醚脱脂处理,脱脂样品按照提取时间4 h、提取温度85.5℃、甲醇乙醇体积比35、料液比126进行粗提,粗提浸膏用20%KSCN溶液盐析,再用40倍量(质量/体积)的95%热乙醇重结晶数次。根据颜色反应和显微镜检验结果判断结晶物的主要成分,采用紫外分光光度法测定浸膏和结晶物中芥子碱含量。结果表明:1菜籽粕残油含量为7.6%。2结晶物主要成分为芥子碱。3菜籽粕浸膏和结晶物的提取率分别为10.01%和2.54%,浸膏和结晶物中芥子碱(以芥子碱硫氰酸盐计)纯度分别为68.22%和91.49%,菜籽粕样品中芥子碱(以芥子碱硫氰酸盐计)的含量为2.32%。利用本研究的工艺,能够有效提取菜籽粕中的芥子碱。该技术提取工艺简单,对仪器设备要求不高,成本低廉,能够满足普通试验要求,值得推广应用。
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