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棉花ISSR-PCR反应体系的正交设计优化

文献类型: 会议论文

第一作者: 曾华兰

作者: 曾华兰 1 ; 张骞方 1 ; 叶鹏盛 1 ; 韦树谷 1 ; 何炼 1 ; 李琼英 1 ;

作者机构: 1.四川省农业科学院经济作物育种栽培研究所,四川简阳 641400

关键词: 正交设计;ISSR-PCR分析;反应条件;棉花体系

会议名称: 中国棉花学会2010年年会

主办单位: 中国棉花学会

页码: 133-137

摘要: 采用正交试验设计的方法,建立了棉花ISSR-PCR分析的优化反应体系。试验结果表明在20μL体系中,DNA浓度为60 ng、ddH2O7.4 μL、Buffer 2 μL、Taq酶1.0U、MgCl23.0 mmol·L-1、dNTPs 3.0 mmol·L-1、引物1.5 μmol·L-1为最佳体系;最佳反应条件为第一步为94℃变性3 min,第二步为94℃变性1 min,51℃退火40 s,72℃延伸90 s,45个循环,第三步为72℃延伸7 min,4℃保存。

分类号: S562.01

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