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国兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化

文献类型: 中文期刊

作者: 李萍 1 ; 何俊荣 2 ; 蒋彧 2 ; 卓碧萍 2 ; 孙淑霞 2 ;

作者机构: 1.西南交通大学

2.四川省农业科学院园艺研究所

关键词: 国兰;分子标记;ISSR-PCR;反应体系;正交设计

期刊名称: 北方园艺

ISSN: 1001-0009

年卷期: 2011 年 17 期

页码: 136-139

收录情况: 北大核心

摘要: 采用正交设计与单因素结合法,对国兰ISSR-PCR反应体系中的4个因素(dNTPs、引物浓度、Mg2+、Taq DNA聚合酶)进行优化试验,结果用DPS软件进行分析。结果表明:各因素对PCR结果均有显著影响,其中Taq DNA聚合酶对反应的影响最大;筛选出了各反应因素的最佳水平,建立国兰ISSR-PCR的最佳反应体系(25μL)为:dNTPs 0.2mmol/L、引物1.0μmol/L、Mg2+2.5mmol/L、Taq DNA聚合酶1U。

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