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甘蓝型油菜CONSTANS基因植物过表达载体构建及转基因植株的获得

文献类型： 中文期刊

作者： 李浩杰 1 ; 张锦芳 1 ; 崔成 1 ; 柴靓 1 ; 蒋俊 1 ; 伍先敏 1 ; 蒋梁材 2 ;

作者机构： 1.;四川省农业科学院作物研究所;仲衍种业股份有限公司

2.;四川省农业科学院作物研究所;仲衍种业股份有限公司;

关键词： 甘蓝型油菜;过表达载体;阳性植株

期刊名称： 分子植物育种

ISSN： 1672-416X

年卷期： 2018 年 01 期

页码： 130-134

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 甘蓝型油菜CONSTANS目的基因的克隆以NCBI上公布的序列设计全长扩增引物进行扩增。对目的基因片段测序并进行酶切位点分析,设计酶切引物(BamHⅠ,SacⅠ),通过BamHⅠ和SacⅠ双酶切将目的基因片段连接在真核表达载体pBI121上,PCR鉴定结果表明PBI121+CONSTANS过表达载体已成功构建。将过表达载体转化感受态EHA105细胞,通过拟南芥花絮侵染T0代种子,用含卡拉霉素(50 mg/L)的MS固体培养基进行筛选,获得阳性植株。通过PCR鉴定,结果表明PBI121+CONSTANS过表达载体已成功导入拟南芥中,获得转基因阳性苗12株,为下一步基因功能分析做好了准备。

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