利用CRISPR-Cas9技术快速创制番茄雄性不育系

杨亮; 刘欢; 李菊; 李志; 苗明军; 龙海成; 周玉洁; 王海娥; 常伟; 《分子植物育种 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：为创制番茄雄性不育系，利用CRISPR-Cas9技术对番茄雄性不育基因SlTM6进行定向编辑，在SlTM6基因第一外显子区域设计两个靶位点，构建CRISPR-Cas9基因敲除载体，并通过农杆菌转化番茄优异自交系T048。对8株转基因阳性株系进行靶位点序列分析发现，共有6株发生了编辑事件，编辑效率为75%，其中，双等位编辑株系表现为柱头外露，雄蕊发育不完全且无花粉活性，而杂合编辑株系可育。对T0代杂合编辑株系进行继代培养后获得无外源载体成分的纯合雄性不育株系，同时开发分子标记并进行验证。本研究表明，通过CRISPR-Cas9技术对雄性不育基因SlTM6进行定向编辑可快速创制雄性不育番茄新种质。

关键词： 番茄（Solanum lycopersicum） 雄性不育 SlTM6 CRISPR-Cas9 基因组编辑