科研产出
香菇gpd启动子的克隆及序列分析
《西南农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以香菇L26菌株为材料,采用Promoter predictions、Web Signal Scan Program及Gardiner-Garden方法对gpd扩增序列进行启动子及Cp G岛预测,MEGA4软件构建与其它食用真菌系统发育树。结果发现该序列(Gen Bank:KF972468.1)具有TAT-box、CAAT-box、IBOXCORE和Cp G岛等特征位点,与Gen Bank中多个食用真菌gpd启动子序列同源性较高,基本证实该序列为香菇gpd启动子,可为转基因研究等提供参考。
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甘薯块根储藏蛋白(Sporamin)启动子克隆及功能验证
《分子植物育种 》 2012 CSCD
摘要：提取甘薯"川薯34"总DNA,设计引物,通过高保真PCR扩增获得了长为1144bp的甘薯储藏蛋白(Sporamin)基因启动子SpoA-p。PLACE在线分析表明:Sporamin启动子具有基本的启动子元件CAAT-box,并包含大量与储藏蛋白表达相关、抗逆相关及蔗糖表达相关的功能组件。构建植物表达载体pBI-SpoA-p::GUS、农杆菌工程菌株EHA105:pBI-SpoA-p::GUS后导入烟草及甘薯,分别得到15株烟草和10株甘薯的阳性转基因植株,GUS染色分析表明烟草各部位中只在根中有基因表达,甘薯根、茎和叶各部位未检测到活性。5%蔗糖诱导处理24h后,在烟草根、茎及叶均观察到GUS活性;在甘薯中只有根有GUS活性。因此,可以看出此启动子为甘薯根部特异的表达启动子,并受蔗糖诱导而表达。
关键词： 甘薯 储藏蛋白基因 启动子 植物表达载体 蔗糖诱导 根部特异的表达
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鸡腿菇gpd启动子的克隆及序列分析
《西南农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以鸡腿168菌株为材料,采用Promoter Signal Scan软件对扩增序列进行启动子分析,Blastn同源性分析近缘真菌gpd启动子序列,并用MEGA4软件构建系统发育树。结果表明,该序列具有TAT-box和CAAT-box特征,且与GenBank中多个真菌gpd启动子序列同源性较高,基本证实该序列为鸡腿168 gpd启动子,可应用于鸡腿菇外源基因表达研究。
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CBF3基因的克隆、生物信息学分析及植物表达载体的构建
《湖南农业科学 》 2009 CSCD
摘要：从拟南芥基因组DNA中分别克隆了CBF3基因和逆境诱导型启动子Rd29A,测序结果显示:克隆的CBF3基因长776bp,编码216个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸同源性达到99.2%,并利用生物信息学手段对其氨基酸序列、进化树、理化性质、疏水性/亲水性等进行分析;启动子Rd29A全长为956 bp,与已报道的该启动子序列比较,其核苷酸同源性为99.5%。以双元载体pCAMBIA1301为基础,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1301-Rd29A-CBF3,为利用CBF2基因提高植物的耐寒性创造了条件。
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冷相关转录因子CBF2基因的克隆及其植物表达载体的构建
《西南农业学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：从拟南芥Columbia基因组DNA中分别克隆了CBF2基因和低温诱导型启动子Rd29A。测序结果显示:克隆的CBF2基因长725 bp,编码216个氨基酸,与GeneBank公布的的序列相比对,核苷酸同源性为99.8%;启动子Rd29A全长为956 bp,与已报道的该启动子序列比较,其核苷酸同源性为99.5%。以双元载体pCAMBIA1301为基础,成功构建了植物表达载体pCAMBIA1301-Rd29A-CBF2,为利用CBF2基因提高植物的耐寒性创造了条件。
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