科研产出
分枝横梗霉LYSF001的毒力基因分析与抗真菌药物敏感性评估
《微生物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:[目的]探讨分枝横梗霉菌株LYSF001 的致病性及其对常见抗真菌药物的耐药性,为动物真菌感染的诊断与治疗提供实验依据.[方法]通过形态学特征和分子生物学技术分离并鉴定菌株;利用PCR技术检测菌株LYSF001 的毒力基因,并构建动物感染模型以评估其致病性;采用组织病理学检查、GMS染色及ITS序列扩增技术分析感染动物的肝脏和肾脏病理变化;通过药敏试验评估菌株 LYSF001 对卡泊芬净、两性霉素 B 和伊曲康唑的敏感性.[结果]菌株LYSF001 鉴定为分枝横梗霉;检测出菌株 LYSF001 携带 5 个毒力基因,分别为 CalA、PKP2、LaeA、Alp2 和AspF1;该菌株感染小鼠后造成 40%的死亡率,试验小鼠内脏充血,其中肝脏和肾脏的病理变化最为显著,表现为炎症细胞浸润和组织坏死;GMS染色显示心脏、肝脏中存在深色菌丝,ITS序列扩增进一步证实了真菌感染;药敏试验证实菌株LYSF001 对两性霉素B及伊曲康唑表现出敏感性,然而该菌株对卡泊芬净存在耐药性.[结论]本研究证实分枝横梗霉菌株LYSF001 具有较强的致病性,可引发动物严重感染甚至死亡;同时,该菌株对两性霉素B和伊曲康唑敏感,但对卡泊芬净耐药.这为动物真菌感染的诊断与治疗提供了重要的实验依据和技术支持.
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花生茎源茉莉炭疽菌的分离鉴定及生物学特性研究
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要:旨在探究首次从花生茎中分离出茉莉炭疽菌(Colletotrichum jasminigenum)的生物学特性。通过三点接种法,经马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar, PDA)培养基分离培养,分别用乳酸酚棉蓝染色和扫描电镜观察其形态,提取分离真菌DNA,用PCR方法扩增ITS区并测序,比对该基因同源性及遗传进化关系。将孢子悬液以5×10~7 CFU·mL-1剂量感染昆明小鼠,并观察小鼠的临床症状、血清生化指标和剖检病变。用K-B纸片法探究其耐药表型。结果显示,分离株分生孢子长29.6μm±0.87μm,呈月牙形;菌丝透明无性,有隔和分枝,无刚毛;附着孢呈棍棒状或者卵球形。PCR扩增得到该菌ITS区序列长度为586 bp,序列提交GenBank(OR472966)。根据形态学结合ITS区序列分析结果确定分离株为茉莉炭疽菌,命名为SLY01。用SLY01菌株攻毒小鼠14 d后导致血清碱性磷酸酶含量极显著升高(P<0.01),肝脏器指数显著下降(P<0.05),并从感染小鼠体内再次分离鉴定出茉莉炭疽菌。组织病理学结果显示,试验组小鼠肺泡壁水肿伴有大量淋巴细胞浸润;肝细胞出现大面积颗粒变性,肝小叶内见出血和肝细胞坏死;肾可见肾小管上皮发生颗粒变性。药敏试验显示,SLY01菌株对卡泊芬净和伏立康唑耐药,对两性霉素B敏感,对伊曲康唑中度敏感。本研究分离鉴定得到茉莉炭疽菌,感染小鼠主要损伤靶器官为肝、肺,并且对多种药物耐药。这为进一步研究茉莉炭疽菌的防治提供理论依据。
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猪链球菌3型的分离鉴定及耐药性分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2024 北大核心
摘要:为查明四川地区某规模化猪场猪发病死亡原因并进行有效防控,试验采集病死猪肺脏组织样本4份进行细菌的分离,并对分离菌株进行菌落形态观察、革兰氏染色和镜检、猪链球菌的PCR鉴定、血清型鉴定、主要毒力基因检测、药敏试验和耐药基因检测。结果表明:从病料中共分离到4株菌,4株分离菌株在胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)中均呈灰白色、针尖状、圆形的菌落,革兰氏染色后镜检可见呈蓝紫色、圆形或卵圆形、链状排列的革兰氏阳性菌,符合猪链球菌的形态特征,分别命名为SYS9、SYS14、SYS15和SYS16。经猪链球菌的PCR鉴定和血清型鉴定确定4株分离菌株均为猪链球菌3型。4株猪链球菌分为2种毒力基因型,SYS9株的毒力基因型为mrp+epf+sly+fbps+cps-orf2+,SYS14、SYS15和SYS16的毒力基因型为mrp+epf+sly+fbps+cps+orf2+;4株猪链球菌均对四环素和泰乐菌素耐药,且均对阿莫西林(青霉素类药物),氟苯尼考和氯霉素(酰胺醇类药物),利奈唑胺(口恶唑烷酮类药物),头孢匹罗、头孢氨苄和头孢拉定(头孢菌素类药物),环丙沙星和左氟沙星(喹诺酮类药物)敏感。除SYS9株仅对四环素和泰乐菌素耐药外,其余3株菌均为3重或3重以上耐药菌株,其中SYS15株为6重耐药菌株。4株猪链球菌均未检出耐药基因ermA、mefA、msrD、fexA、fexB、aph(3′)-Ⅲa、ant(6′)-Ⅰa、aph(2′)-Ⅰb; SYS9株检出耐药基因tetO和ermB,SYS14株检出耐药基因tetM、tetO、ermB、aac(6′)-aph(2″)和optrA,SYS15株检出耐药基因tetM、tetO、tetL、ermB、aac(6′)-aph(2″)和optrA,SYS16株检出耐药基因tetM、tetO、tetL、ermB、aac(6′)-aph(2″)、optrA和Lsa(E)。说明该规模化猪场猪发病死亡原因为猪链球菌3型感染,可使用青霉素类、酰胺醇类、口恶唑烷酮类、头孢菌素类、喹诺酮类药物进行治疗。
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食品中克罗诺杆菌分离菌株生物被膜形成、耐药性及毒力基因检测
《食品工业科技 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:研究食品中克罗诺杆菌分离菌株的生物被膜形成、耐药性以及携带毒力基因情况。在成都市周边农贸市场和路边小摊采集食品样品129份,采用DFI阪崎肠杆菌显色培养基分离克罗诺杆菌;通过16S rRNA序列比对分析鉴定分离菌株;采用试管法和微孔板法分析菌株生物被膜形成能力,同时研究温度对细菌成膜能力影响;采用纸片法检测分离菌株对18种抗生素的耐药性;采用PCR方法检测分离菌株携带cpa、hly、sip和omp X毒力基因情况。结果发现从129份食品样本中共检出克罗诺杆菌43株,检出率为33.3%。43株克罗诺杆菌食品分离菌株的成膜率为90.7%,并且温度对细菌成膜影响明显。四种毒力基因中,omp X检出率为100%; cpa检出率为13.9%; hly检出率为11.6%; sip基因未检出。耐药表型检测发现43株克罗诺杆菌食品分离菌株对青霉素、克林霉素、万古霉素、苯唑西林和杆菌肽B的耐药率为100%,对利福平的耐药率达97.7%;对红霉素的耐药率为7%;对环丙沙星、庆大霉素、四环素、氯霉素、亚胺培南、磺胺甲恶挫、呋喃妥因、头孢西丁、链霉素、阿米卡星、氧氟沙星等100%敏感。本研究表明克罗诺杆菌食品分离菌株具有较好的形成生物被膜能力,对常见的抗生素耐药率较高,并且分离菌株携带一定的毒力基因,对食品安全造成潜在威胁。
关键词: 克罗诺杆菌 食品分离菌株 生物被膜形成 耐药性 毒力基因
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鸡毒支原体研究概况
《动物医学进展 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:鸡毒支原体(MG)是对养禽业危害很大的支原体,主要导致禽类慢性呼吸道疾病(CRD),以禽的结膜炎、产蛋率及饲料转换率下降、屠宰率下降等为主要特征。MG可通过垂直和水平传播方式在鸡群中传播,每年给全球家禽产业带来巨大经济损失。随着对MG细胞表面抗原黏附素蛋白(pMGA)和PvpA、GapA的结构与功能研究的深入,K株、TG5株等MG疫苗研究也取得较大进展。由于抗生素的滥用,MG基因中也发生耐药突变,产生了QRDRs等抗药结构,导致MG在耐药性上也出现新的特点。论文主要对国内外MG的疫苗开发、耐药情况和检测技术等进行综述,旨在对家禽MG的综合防控提供借鉴。
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耐福美双的哈茨木霉菌株诱导及其几丁质酶生防特性研究
《云南农业大学学报(自然科学版) 》 2010 北大核心 CSCD
摘要:用紫外线诱变与药剂驯化相结合的方法,以哈茨木霉Th-30为出发菌株诱导得到4株能在含杀菌剂福美双2.0×105μg/L的培养基上正常生长的耐受性提高近10倍变异菌株。其中变异菌株UV-4在高浓度福美双培养基能正常生长并产生具有生防功能的几丁质酶,该几丁质酶能抑制黄瓜炭疽病菌产孢能力的85.43%,抑制致病力达68.88%,并能降解该病菌菌丝的细胞壁。UV-4菌株遗传稳定,具与福美双混用协同防治蔬菜上的真菌病害的潜力。
关键词: 哈茨木霉 抗药性 几丁质酶 黄瓜炭疽病菌 拮抗作用
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四川省稻瘟病菌对稻瘟灵的抗药性研究
《西南农业学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要:采用生长速率法测定了2004~2007年分离自四川省16个地区(市、州)41个县(市)的208个有效稻瘟病菌单孢对稻瘟灵的抗药性。结果表明:全省最不敏感菌株EC50值(20.7794μg/mL)是最敏感菌株EC50值(0.8135μg/mL)的24.54倍。确定了四川省水稻稻瘟病菌对稻瘟灵的敏感基线为6.9749μg/mL。全省没有出现对稻瘟灵产生高抗药性和中抗药性菌株,大部稻瘟病菌株都表现为低抗水平(?3),有的地区低抗菌株出现频率为0。因此,只要加强田间抗药性监测,稻瘟灵在四川水稻生产上仍可作为防治稻瘟病的有效药剂使用。
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川西平原油菜菌核病菌群体结构研究
《西南农业学报 》 2006 CSCD
摘要:2002年5月在川西平原4个地区:蒲江大兴、邛崃卧龙、双流黄水和邛崃固驿,从油菜病株茎杆上采集菌核,经分离和鉴定,共得到373个菌株进行菌丝生长速率、对多菌灵敏感性、菌丝融合群和遗传多样性的测定和分析,结果表明:川西油菜菌核病菌群体结构呈地域间和田块内的分化。病菌群体由遗传背景不同的8个亚类组成,而8个亚类的分布呈明显的区域性,不同地点同一田块内核盘菌株分属1(邛崃固驿)至4个(邛崃卧龙)亚类。各亚类由属于多个菌丝融合群的菌株组成,不同地点仅个别菌株属同一菌丝融合群。不同菌株间菌丝生长速度呈较大差异,各采样地点菌株平均生长速度差异较大。生长速度较快的284个菌株对多菌灵普遍敏感。
关键词: 油菜菌核病菌 多菌灵 抗药性 菌丝融合群 菌丝生长速度 RAPD
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