科研产出
家蚕淀粉酶基因(Bmamy2)的分子克隆及表达特征和序列分析
《蚕业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：淀粉酶在生物体内的碳水化合物代谢中起重要作用。根据预测的基因序列设计引物,克隆了一个家蚕淀粉酶基因(Bmamy2),获得完整的编码区序列(全长1 752 bp,编码583个aa)。用推导的氨基酸序列与其它物种的淀粉酶基因作相似性比较和系统发育分析,发现所克隆的Bmamy2基因是一个起源很早的拷贝,在细菌、果蝇、非洲蟾蜍、人和鸡等多种生物中存在与之同源的基因。该基因编码蛋白的功能结构域预测有2个起催化作用的关键氨基酸发生突变,推测该基因可能失去了催化水解碳水化合物的功能。RT-PCR和基因芯片检测结果表明,该基因在家蚕5龄第3天幼虫的中肠和脂肪体中表达,且在中肠中的表达丰度较高。
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异戊烯基转移酶基因克隆及植物表达载体构建
《重庆大学学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：根据已知的异戊烯基转移酶基因保守序列设计引物,以根癌农杆菌C58的Ti质粒为模板,采用PCR方法扩增获得了异戊烯基转移酶基因723bp的片段。将该片段回收,连接到pMD18-T载体测序,测序片段经酶切回收后克隆到植物表达载体pB I121中,转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α。将阳性质粒转化农杆菌感受态细胞EHA105,经菌液和质粒PCR分析,获得了真核表达载体pB I121-ipt,这为异戊烯基转移酶基因功能的进一步研究提供了基础。
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水稻香味基因的精细定位
《分子植物育种 》 2008 CSCD
摘要：随着现代生物技术的发展,越来越多的报道证明,香稻的香味物质为2-乙酰-1-吡咯啉,水稻的香味性状受位于水稻第8染色体上的1对隐性基因控制。本研究以11个香稻品种和4个非香稻品种为材料,分析了香味基因的遗传;以茉莉花香型的粳稻品种粳香米和非香品种MR63的F2群体为材料,对控制香味性状的基因进行了精细定位。结果表明,水稻香味受1对隐性基因控制,并将香味基因定位在水稻第8染色体上,位于InDeL标记AP05537-17和AP004463-13之间,与标记AP004463-13间的距离为0.4cM,与标记AP05537-17间的距离为1.6cM,在物理图谱上的物理距离大约252kb。分析发现BAC克隆AP004463最有可能包含该基因。最终在该区域内预测有15个基因可能与该香味基因相关。
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苏云金芽孢杆菌猝倒亚种Cry1 Aa13基因的克隆及序列分析
《四川大学学报(自然科学版) 》 2004 北大核心 CSCD
摘要：根据GenBank中Cry1A类基因序列设计一对特异性引物,以苏云金芽孢杆菌猝倒亚种质粒DNA为模板,应用PCR扩增技术得到一大小约为3.6kb的DNA片段(Cry1Aa13).通过引物步行法测定该片段长3598bp,其中开放阅读框(ORF)长3540bp,编码1180个氨基酸,分子量为133.49kD,等电点pI=5.0.序列比较表明该基因与Cry1Aa类基因高度同源(达95%以上),该基因已在GenBank中登录,登录号为AF510713,并被Btδ 内毒素基因国际命名委员会正式命名为Cry1Aa13.
关键词： 苏云金芽孢杆菌猝倒亚种 Cry1Aa13 PCR 克隆 序列分析
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家蚕核型多角体病毒山东株p35基因的克隆及序列分析
《遗传 》 2003 北大核心 CSCD
摘要：根据家蚕核型多角体病毒T3株p35基因非编码区序列设计一对特异性引物,应用PCR技术从家蚕核型多角体病毒山东株中扩增得到一条1080bp的片段。测序结果表明,该片段含有p35基因,开放阅读框长900bp,编码299个氨基酸,分子量为34.91kDa,pI=6.4。序列分析表明,BmNPV山东株的p35基因与T3株存在差异。
关键词： 家蚕核型多角体病毒山东株 p35基因 克隆 序列分析
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苏云金杆菌以色列亚种几丁质酶基因的克隆及序列分析
《遗传学报 》 2003 SCI 北大核心 CSCD
摘要：从苏云金芽孢杆菌以色列亚种 (Bacillusthuringiensissubspisraelensis)中提取基因组DNA ,通过合成 1对特异性引物 ,用touchdownPCR的方法扩增几丁质酶ichi基因序列 (GenBank登录号 :AF5 2 6 379)。ichi序列全长为 2 5 70bp ,含有 1个 2 0 6 7bp的开放阅读框 (ORF) ,编码 6 88个氨基酸 ,推测分子量为 75 79kDa ,等电点pI=5 90的几丁质酶前体。序列和结构比较分析表明 :Ichi氨基酸序列与蜡状芽孢杆菌 (Bacilluscereus) 2 8 9几丁质酶CW、蜡状芽孢杆菌CH几丁质酶B及苏云金芽孢杆菌墨西哥亚种几丁质酶的同源性分别为 97 2 4 %、97 18%、97 6 3% ,而与苏云金芽孢杆菌巴基斯坦亚种的同源性只有 6 3 0 7%。Ichi编码区由分泌信号肽 (46AA)、催化区 (10 5AA)、粘蛋白Ⅲ型同源区 (74AA)及几丁质结合区 (40AA)组成。
关键词： 苏云金芽孢杆菌以色列亚种 几丁质酶基因 克隆 序列分析
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Frankia菌株Cc01固氮酶结构基因的克隆
《西南农业学报 》 1992
摘要：将分离自细枝末麻黄(Casuarina cunninghamiana)的Frankia菌株Cc01的总DNA经限制酶BamHI完全酶切,电泳后用Southern法转移到硝酸纤维素滤膜上,以肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)的固氮酶结构基因(nifHDK)为探针与之杂交,其中5.5Kb的DNA片段显示较强的同源杂交。然后以P~(BR322)为载体,从Frankia菌株Cc01的总DNA中克隆了此5.5Kb的同源片段。此片段与来自肺炎克氏杆菌的nifH、nifK、nifD基因分别杂交,均显示较强的同源性,说明Frankia菌株Cc01的nifH、nifK、nifD基因紧密连锁并都位于-5.5Kb的BamHI酶切片段上。
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