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柑橘类枯草杆菌蛋白酶基因CcSubtilisin的克隆及遗传转化

文献类型： 中文期刊

作者： 李菊 1 ; 张永艳 2 ; 胡敏伦 2 ; 闫化学 2 ; 姜波 2 ; 谢丹 2 ; 袁超力 2 ; 钟广炎 2 ;

作者机构： 1.四川省农业科学院园艺研究所

2.广东省农业科学院果树研究所

关键词： 丝氨酸蛋白酶;枯草杆菌蛋白酶;基因克隆;序列分析;遗传转化

期刊名称： 西南大学学报(自然科学版)

ISSN： 1673-9868

年卷期： 2015 年 37 卷 07 期

页码： 59-66

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以克里曼丁橘[Citrus clementina]叶片RNA为材料,采用RT-PCR技术克隆获得了一个编码类枯草杆菌蛋白酶的基因,命名为CcSubtilisin.该基因的开放阅读框(ORF)长度为2 337bp,预测可编码778个氨基酸残基的多肽.分析发现CcSubtilisin与拟南芥、蓖麻、番茄、毛果杨、大豆、挪威云杉、欧洲桤木、百合等18个物种的同源蛋白具有相同的4个保守区域,属于枯草杆菌蛋白酶.通过构建该基因的超表达载体并以沙田柚为材料进行遗传转化,获得了该基因的9个转基因沙田柚株系.实时定量PCR结果表明,4个用于检测的株系中有3株的表达量明显高于对照.

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