文献类型: 中文期刊
作者: 唐静 1 ; 蒲志刚 2 ; 张敏 1 ; 阎文昭 2 ;
作者机构: 1.四川农业大学农学院
2.四川农业科学院生物技术核技术研究所
关键词: 小麦锈菌;AFLP标记
期刊名称: 中国农学通报
ISSN: 1000-6850
年卷期: 2005 年 21 卷 08 期
页码: 325-329
摘要: 以小麦条锈菌、杆锈菌、叶锈菌的夏孢子为材料,通过DNA提取、酶切、PCR扩增、凝胶电泳等系列程序摸索和优化,建立了锈菌的AFLP分子标记体系如下:40μl酶切体系中采用了EcoRI、TrulI各5U,37℃3h,65℃3h双酶切4μl100ng/μl的DNA;然后加入10μl连接混合液22℃连接3h,16℃10h;连接产物5μl,10μMEcoRI、10μMTru1I预扩引物各1.5μl,PCR反应液25μl,ddH2O17μl进行预扩;预扩产物稀释20倍后取5μl,50ng/μlEcoRI、Tru1I选扩引物各1μl,PCR反应液10μl,ddH2O3μl体系进行选择性扩增,为小麦锈病和其他真菌性病害的分子标记克隆及抗病育种的辅助选择提供了有力工具。
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