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甘蓝型油菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BnBADH-1)的克隆与真核表达载体的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 李浩杰 1 ; 蒲晓斌 1 ; 张锦芳 1 ; 蒋俊 1 ; 胡海兵 1 ; 郑本川 1 ; 蒋梁材 1 ;

作者机构: 1.四川省农业科学院作物研究所

关键词: 甘蓝型油菜;甜菜碱醛脱氢酶;基因克隆;载体构建

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2013 年 11 卷 01 期

页码: 61-69

收录情况: CSCD

摘要: 根据已知的拟南芥甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH1)序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术从甘蓝型油菜中克隆出油菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BnBADH-1)全长。测序和分析结果表明,BnBADH-1的cDNA全长1506bp,编码一个包含501个氨基酸残基、分子量为55kD、等电点(pI)为5.16的假定蛋白质;核酸序列和氨基酸序列与拟南芥的同源性分别为90.24%和93.41%。利用片段两端的粘性末端酶切位点BamHⅠ和SacⅠ将cDNA片段连接在真核表达载体pBI121上;PCR鉴定表明,过量表达载体pBI121-BnBADH-1已成功构建,为下一步的基因功能分析做好了准备。

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