附子白绢病拮抗细菌的分离鉴定及发酵条件优化

施春兰; 汤永玉; 叶坤浩; 曾舒泉; 张永科; 何霞红; 魏朝霞; 曾华兰; 叶鹏盛; 吴国星; 《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD

摘要：【目的】从黄粉甲中分离获得对附子白绢病病原菌具有较好抑制作用的拮抗细菌，为附子白绢病的生物防治提供菌种资源。【方法】以罹病黄粉甲为材料，通过稀释涂布法和平板对峙法分离并筛选对附子白绢病菌具有拮抗作用的细菌，通过形态结构、生理生化特征及16S r DNA序列分析等对拮抗细菌进行种类鉴定；以拮抗细菌发酵液在600 nm波长下的OD值为指标，采用单因素试验的方法对拮抗细菌的培养基组分以及发酵条件进行优化；通过室内盆栽试验明确拮抗细菌对附子白绢病的防治效果。【结果】采用稀释涂布法从罹病黄粉甲中分离获得4株细菌，经平板对峙法筛选获得对附子白绢病菌具有较好拮抗效果的菌株TS1，该菌对齐整小核菌菌丝生长的抑制率可达68.03%。根据菌株TS1的菌落形态结构、生理生化特征及16S r DNA序列分析结果，确定菌株TS1为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。菌株TS1的优化培养基配方：蛋白胨10.0 g/L、酵母浸粉5.0 g/L、麦芽糖15.0 g/L；最佳发酵条件：装液量30mL、初始接种量0.50%、转速210 r/min、培养温度42℃、初始pH 9、培养时间48 h。室内盆栽保护和治疗试验结果表明，菌株TS1对附子白绢病的平均防治效果分别为49.39%和62.97%。【结论】优化的发酵方案可用于快速、大批量培养菌株TS1菌悬液。菌株TS1对附子白绢病有较好的防治效果，具有开发成附子白绢病生防菌的潜力。

关键词： 黄粉甲 内生细菌 枯草芽孢杆菌 齐整小核菌 发酵条件 防治效果