四川莴笋上番茄斑萎病毒的电镜观察与小RNA测序鉴定

韩帅; 吴婕; 张河庆; 席亚东; 《园艺学报 》 2022 北大核心 CSCD

摘要：为明确引起四川彭州葛笋病毒病的病毒种类,通过生物接种和电子显微镜方法,结合小RNA测序技术和反转录PCR对采集病样进行鉴定和分析.摩擦接种试验表明回接莴笋的发病症状与田间相似,矮牵牛叶片出现局部枯斑;利用电镜可观察到叶肉细胞中有大量病毒粒体聚集于内质网池,其形态特征与正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)病毒相似;通过小RNA测序技术获得了番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV)接近全长的序列,表明侵染该批次葛笋样品的病原物可能是TSWV.利用RT-PCR方法确定田间和回接葛笋及枯斑寄主中均存在TSWV,进一步证明四川彭州葛笋病毒病是由TSWV侵染引起的,这是四川首次发现TSWV为害葛笋.对拼接序列和N基因序列分别构建系统发育树可知,彭州分离物TSWV-SCPZ分别与韩国分离物(YY和K)和美国分离物(MR-01)亲缘关系最近.

关键词： 葛笋 番茄斑萎病毒 小RNA测序 电子显微技术